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新品新方案!準(zhǔn)確、高通量、可重現(xiàn)的類(lèi)器官生長(zhǎng)與分析

閱讀:300      發(fā)布時(shí)間:2024-8-22
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近年來(lái),類(lèi)器官正在迅速成為基礎(chǔ)研究和藥物發(fā)現(xiàn)的有力工具,為腫瘤研究、再生醫(yī)學(xué)、疾病建模及藥物篩選等生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究提供有效的分析模型。

 

類(lèi)器官培養(yǎng)及分析

 

類(lèi)器官培養(yǎng)是一個(gè)耗時(shí)且對(duì)技術(shù)要求很高的流程。培養(yǎng)的起始點(diǎn)可以是組織中的特異性成人干細(xì)胞,或是從患者活檢樣本中提取的腫瘤干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞(ESCs)或多能干細(xì)胞(iPSCs)。將這些細(xì)胞在3D細(xì)胞外基質(zhì)中進(jìn)行培養(yǎng)并分化成各類(lèi)不同的類(lèi)器官模型,最后通過(guò)成像等方法對(duì)化合物或藥物處理后的類(lèi)器官進(jìn)行表征分析,模擬和深入了解由此帶來(lái)的類(lèi)器官活性、形態(tài)以及功能的變化。

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圖1. 3D類(lèi)器官培養(yǎng)和分析流程

 

Matrigel®能夠形成讓不同類(lèi)型細(xì)胞發(fā)育成類(lèi)器官的3D支架并提高類(lèi)器官培養(yǎng)的質(zhì)量和效率,可以說(shuō)是類(lèi)器官培養(yǎng)的黃金標(biāo)準(zhǔn),但仍存在局限性有待進(jìn)一步優(yōu)化:

1 均一性:類(lèi)器官生長(zhǎng)于膠滴的不同位置,能夠接觸到的培養(yǎng)基、細(xì)胞和生長(zhǎng)因子不均勻,因此對(duì)于有效生長(zhǎng)和分化成均一的類(lèi)器官有一定的影響

2 操作性:通常使用高濃度Matrigel®(50%或更高)進(jìn)行類(lèi)器官培養(yǎng),一方面成本較高,另外Matrigel®粘度很高,增加清洗、換液及后續(xù)類(lèi)器官分離的難度,自動(dòng)化技術(shù)或大規(guī)模批量處理具有挑戰(zhàn)性

3 分析難度高:類(lèi)器官分散在膠滴的多個(gè)層面,增加了分析的難度和時(shí)間消耗

 

 

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圖2. 使用Matrigel®進(jìn)行類(lèi)器官培養(yǎng)

 

Incucyte® 3D細(xì)胞微孔板

 

賽多利斯全新發(fā)布Incucyte® 3D細(xì)胞微孔板,為3D類(lèi)器官的高效培養(yǎng)和高質(zhì)量分析提供新方案!允許在生理相關(guān)環(huán)境中自動(dòng)生成均一優(yōu)質(zhì)的類(lèi)器官,并結(jié)合Incucyte®實(shí)時(shí)活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)

實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)程、高通量、可重現(xiàn)的類(lèi)器官生長(zhǎng)和活性監(jiān)測(cè)。

 

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Incucyte® 3D細(xì)胞微孔板優(yōu)勢(shì)

 

1 形成均一類(lèi)器官,進(jìn)行可靠的長(zhǎng)期分析監(jiān)測(cè)

獨(dú)特的微孔陣列設(shè)計(jì),允許每個(gè)微孔中的細(xì)胞有效間隔,充分且均勻接觸到培養(yǎng)基、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子,并提高細(xì)胞間的物質(zhì)交換,有助于形成均一的單個(gè)類(lèi)器官。

 

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圖3. 分別使用兩塊不同的Incucyte®3D細(xì)胞微孔板進(jìn)行同一類(lèi)器官的培養(yǎng),并使用兩臺(tái)不同的Incucyte®(序列號(hào)IC50438和IC70542)分別對(duì)兩塊板進(jìn)行成像分析;類(lèi)器官總面積分析結(jié)果表明不同批次板子能夠穩(wěn)定生產(chǎn)均一、可重復(fù)的類(lèi)器官

 

2 簡(jiǎn)化培養(yǎng)和分析流程

即拆即用,無(wú)需清洗或離心。類(lèi)器官懸浮在孔中培養(yǎng),而非包埋在Matrigel®中,只需使用少量的Matrigel®(1-2%濃度),簡(jiǎn)化操作并節(jié)約成本??梢酝ㄟ^(guò)獨(dú)特設(shè)計(jì)的移液口更換培養(yǎng)基,進(jìn)一步保護(hù)類(lèi)器官。

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3 賦能高通量藥物篩選

均勻且高通量類(lèi)器官形成對(duì)藥物篩選至關(guān)重要,以提高結(jié)果的可靠性、可重復(fù)性和可解釋性。Incucyte®3D細(xì)胞微孔板能夠在96孔的每個(gè)孔中均勻生成73個(gè)類(lèi)器官用于高通量藥物篩選。Incucyte®能夠?qū)φ缀驼暹M(jìn)行長(zhǎng)時(shí)程成像,監(jiān)測(cè)和定量分析藥物對(duì)每個(gè)類(lèi)器官的影響。

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Incucyte®在不干擾培養(yǎng)環(huán)境的前提下,在培養(yǎng)箱內(nèi)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和定量類(lèi)器官的分化(類(lèi)器官培養(yǎng)QC)或生長(zhǎng)和死亡(類(lèi)器官分析)。使用 Incucyte® 類(lèi)器官分析軟件模塊捕獲不同的類(lèi)器官形態(tài),追蹤細(xì)胞死亡并分析大小變化(總明場(chǎng)面積)。將腸道類(lèi)器官在Incucyte® 3D 細(xì)胞微孔板中培養(yǎng),并用十字孢堿 (1 μM, STP)、喜樹(shù)堿 (1 μM)、環(huán)己酰亞胺 (10 μM) 和 5-FU (100 μM) 處理 5 天。類(lèi)器官圖像和時(shí)間進(jìn)程數(shù)據(jù)展示了多種化合物和控制條件隨時(shí)間帶來(lái)的影響。

 

4 優(yōu)化成像和分析效果,減少偽影

與將類(lèi)器官包埋入 Matrigel® 等其他方法相比,Incucyte® 3D 細(xì)胞微孔板可將類(lèi)器官保持在同一焦平面,從而減少成像偽影。使用Incycte® 和Incucyte® 類(lèi)器官分析軟件模塊來(lái)自動(dòng)定位、成像和分析類(lèi)器官,從而提供有關(guān)形態(tài)、大小和數(shù)量的重要信息。

 

賽多利斯賦能3D細(xì)胞研究與藥物發(fā)現(xiàn)

 

賽多利斯3D細(xì)胞研究的儀器解決方案

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了解更多Incucyte® 3D細(xì)胞微孔板
在類(lèi)器官培養(yǎng)及分析的應(yīng)用

 

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《Incucyte® 3D細(xì)胞微孔板》

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