針頭濾器和濾膜是分析實(shí)驗(yàn)室的常用耗品,相信實(shí)驗(yàn)汪寶寶們都不陌生。在液相色譜檢測(cè)之前,一般需要對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行預(yù)處理,除去顆粒雜質(zhì)以保護(hù)色譜柱和儀器設(shè)備。樣品過(guò)濾通常用針頭濾器;流動(dòng)相的預(yù)處理則通常用真空抽濾(全玻璃夾具+過(guò)濾膜片)的方法,可以從相應(yīng)的溶劑中去除顆粒雜質(zhì),如沉淀物或灰塵,同時(shí)也可對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣。
色譜分析實(shí)驗(yàn)有時(shí)候會(huì)很傷腦筋,因?yàn)闉V膜與流動(dòng)相接觸時(shí),有可能會(huì)產(chǎn)生浸出物,對(duì)色譜分析產(chǎn)生干擾。比如,賽多利斯的科學(xué)家們最近做的一個(gè)研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,再生纖維素RC膜不會(huì)釋放浸出物,而聚酰胺PA (尼龍) 膜可能會(huì)釋放少量的有機(jī)物。
在此項(xiàng)研究中,評(píng)估了再生纖維素RC膜和聚酰胺PA膜(尼龍)這兩種常用濾膜在對(duì)液相色譜分析中常用溶劑/洗脫液進(jìn)行過(guò)濾時(shí),釋放浸出物的可能性。使用經(jīng)RC膜過(guò)濾的純水和磷酸鹽緩沖液作為洗脫液進(jìn)行HPLC-UV/VIS和LC-HRMS分析時(shí),譜圖中沒(méi)有出現(xiàn)雜峰。而在對(duì)經(jīng)PA 膜過(guò)濾的洗脫液分析時(shí),早期能檢測(cè)到小的洗脫峰,這可能是聚酰胺低聚物導(dǎo)致的。即聚酰胺濾膜可能會(huì)釋放少量的有機(jī)物,在其應(yīng)用時(shí)應(yīng)考慮這一點(diǎn)。
同理,在樣品過(guò)濾過(guò)程中,針頭濾器在與樣品接觸時(shí)也可能會(huì)有這樣的風(fēng)險(xiǎn)。因此可見(jiàn),再生纖維素RC膜是樣品/流動(dòng)相過(guò)濾的優(yōu)選,因?yàn)樗挠袡C(jī)化合物釋放量極低,不會(huì)對(duì)分析結(jié)果造成干擾。RC膜材質(zhì)純凈,并且化學(xué)兼容性廣泛。不僅非常適合有機(jī)溶劑/混合溶劑的過(guò)濾,如DMSO 和酮類/酯類/醚類等常用有機(jī)溶劑均可過(guò)濾,同時(shí)也能過(guò)濾水溶液,是真正的多用途濾膜。
具體實(shí)驗(yàn)情況如何,讓我們一探究竟吧:
實(shí)驗(yàn)濾膜: 0.2μm孔徑的再生纖維素RC膜和聚酰胺(尼龍)PA膜
實(shí)驗(yàn)溶劑: 純水、NaH2PO4緩沖液、純乙腈三種溶劑,模擬要過(guò)濾的洗脫液
實(shí)驗(yàn)方法:HPLC-UV/VIS紫外可見(jiàn)分光光度法、TOC、高分辨率質(zhì)譜(HRMS)
實(shí)驗(yàn)1
使用HPLC-UV/VIS來(lái)考察在常規(guī)分析中不同濾膜對(duì)于洗脫液過(guò)濾的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,總體來(lái)看,浸出物的含量非常低。
聚酰胺PA膜過(guò)濾的洗脫液,早期能檢測(cè)到洗脫峰。RC濾膜的譜圖與對(duì)照品并無(wú)差異。
實(shí)驗(yàn)2
分析純水經(jīng)再生纖維素RC膜或聚酰胺PA膜過(guò)濾后的TOC
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)照品及兩種洗脫液提取物的TOC值均在≤200ppb(ng/mL)范圍內(nèi),說(shuō)明其有機(jī)污染物含量水平非常低。
不過(guò)通過(guò)PA膜過(guò)濾后的濾液的TOC值稍高,說(shuō)明這些樣品中有機(jī)物的含量稍高。
實(shí)驗(yàn)3
采用高分辨質(zhì)譜法HRMS測(cè)定兩種膜對(duì)乙腈的影響
過(guò)濾后乙腈的質(zhì)譜如下圖所示:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,洗脫液和對(duì)照品的所有質(zhì)譜圖只有微小的差別。
但在ESI正電離模式下所得的乙腈濾液質(zhì)譜圖顯示了一些PA膜的小信號(hào),這些信號(hào)可能歸屬為聚酰胺低聚物。
這個(gè)結(jié)果與該過(guò)濾膜材料的TOC和HPLC-UV/VIS結(jié)果一致。
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