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酪氨酸羥化酶（TH）ELISA 試劑盒

間接法

間接法常用于檢測(cè)抗體，一般的操作步驟為：

1. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。

2. 加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)的一次抗體，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。

3. 洗去多余待測(cè)檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測(cè)的一次抗體鍵結(jié)。

4. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器（ELISA reader）測(cè)定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。

5. ELISA的試劑

   在臨床檢驗(yàn)中一般采用商品試劑盒進(jìn)行測(cè)定。ELISA中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：

6. 工作原理

7.  

    

   酪氨酸羥化酶（TH）ELISA 試劑盒

    

   本試劑盒采用雙位點(diǎn)夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），測(cè)定樣品中的水平。向預(yù)先包被抗體的酶標(biāo)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和HRP標(biāo)記的抗體，經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的組分，然后再加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關(guān)。

   ⑴已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

   ⑵酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

   ⑶酶的底物；

   ⑷陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；

   ⑸酶聯(lián)物（結(jié)合物）及標(biāo)本的稀釋液；

   ⑹洗滌液；

   ⑺酶反應(yīng)終止液。