膠片的色調(diào)（或稱(chēng)反差）。當(dāng)一種照相乳膠片用它所敏感的波長(zhǎng)光照射時(shí)，在曝光量（光流量x曝光時(shí)間）和被顯影后底片上銀穎拉的數(shù)量之間存在著一定的關(guān)系。單位面積底片上銀顆粒的數(shù)量稱(chēng)為密度，顯微鏡它可以用密度計(jì)來(lái)測(cè)量，當(dāng)?shù)灼系拿芏菵對(duì)應(yīng)于曝光量的對(duì)數(shù)被繪成曲線時(shí)，就可以看出兩者之間并不是一個(gè)簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。只有在曲線的p-q部分存在著線性關(guān)系，數(shù)碼顯微鏡當(dāng)達(dá)到高峰值后，曝光量的進(jìn)一步增加反而引起密度的降低。線性的P-9部分具有一定的斜度，這個(gè)斜度就是膠片的色調(diào)或者稱(chēng)為膠片的反差（注意不要與像的反差混淆），它的度量單位是伽馬，但也可以用角a表示。當(dāng)a二450時(shí)，伽馬是1，當(dāng)a>450,曝光量上的小的變化就會(huì)引起底片密度的大幅度變化，這時(shí)膠片的反差就大，這種膠片被說(shuō)成是硬的，當(dāng)a<45曝光量上的大的變化只能引起底片密度的較小顯微鏡變化，這時(shí)膠片的反差小，這種膠片可以說(shuō)是軟的?？梢钥闯銮€的P-9部分在橫坐標(biāo)上的投影將指示出膠片曝光的合適范圍，并且這個(gè)因素是同膠片的反差相關(guān)的。

    由于在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中所遇到的大多數(shù)顯微鏡標(biāo)本成分之間的吸收差異是不太大的，因此在顯微照相中應(yīng)采用反差較大的膠片來(lái)補(bǔ)償顯微鏡像較小的反差。另外還可以通過(guò)延長(zhǎng)顯微鏡顯影時(shí)間或增高顯影液濃度來(lái)增大顯微鏡底片的反差。

    膠片的感光速度。數(shù)碼顯微鏡的膠片的感光速度在歐洲是用DIN數(shù)表示，在美國(guó)及其他許多地區(qū)使用ASA系統(tǒng)。DIN值每增加3個(gè)數(shù)字，感光速度增大1倍，而ASA系統(tǒng)是以幾何級(jí)數(shù)加倍的，現(xiàn)將兩種系統(tǒng)的對(duì)應(yīng)關(guān)系（每級(jí)感光速度增加十倍）列在下面:

   在許多情況下對(duì)于顯微照相中不移動(dòng)的標(biāo)本來(lái)說(shuō)膠片的感光速度不是很重要的，除了很快褪色的標(biāo)本以外，顯微鏡不需要用感光速度很快的膠片。一般可以說(shuō)膠片的顆粒愈細(xì)，反差愈大，感光速度也就愈慢，在顯微照相中大多采用具有較細(xì)顆粒、顯微鏡適當(dāng)高分辨力和中等反差的膠片。