一、實(shí)驗(yàn)原理

   近半個(gè)世紀(jì)前，Kivy和Dember等人證明大鼠能辨別T-形迷宮（T-maze）兩臂顏色的變化。他們發(fā)現(xiàn)，將雄性大鼠置于T-形迷宮的主干臂 15-30min，讓其能看見、但不能進(jìn)入黑白兩臂。然后，改變其中一個(gè)臂的顏色，使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇T-形臂。結(jié)果顯示，大鼠總是選擇改變了顏色的那個(gè)臂（新異臂）。這一過程要依靠動(dòng)物的記憶來完成。由此發(fā)展而成的T-形迷宮實(shí)驗(yàn)成為目前用于評價(jià)空間記憶的zui常用的動(dòng)物模型之一。當(dāng)然，現(xiàn)在的T-形迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動(dòng)物探究的動(dòng)力。通常用這一模型來研究動(dòng)物的空間工作記憶（spatial working memory），即測定動(dòng)物只在當(dāng)前操作期間有用的信息。經(jīng)改進(jìn)后的T-形迷宮也可用來評價(jià)參考記憶（reference memory），即記錄在這一實(shí)驗(yàn)中任何一天、任何一次的測試都有用的信息。安徽正華生物儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的Ｔ迷宮是檢測嚙齒類動(dòng)物空間工作記憶的一種經(jīng)典行為學(xué)方法，與前額葉皮層功能相關(guān)。小鼠節(jié)食至原體重85％。

技術(shù)參數(shù)：

1、實(shí)驗(yàn)總時(shí)間

2、活動(dòng)總路程

3、左臂進(jìn)入次數(shù)

4、右臂進(jìn)入次數(shù)

5、左臂潛伏期（從主臂進(jìn)入左臂的時(shí)間）

6、右臂潛伏期（從主臂進(jìn)入右臂的時(shí)間）

7、主臂滯留時(shí)間

8、主臂活動(dòng)路程

1)          開放場有多種幾何圖形選擇，可方便勾畫出各種形狀的開放場；

2)          支持離線及在線實(shí)時(shí)分析，節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間和實(shí)驗(yàn)人員

3)          軟件自動(dòng)跟蹤分析，生成EXCEL文件，可在SPSS等統(tǒng)計(jì)分析軟件直接分析；（軟件同時(shí)自帶強(qiáng)大的分析功能，包含超過30多種統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)）

4)          可以人工輔助記錄多達(dá)26種視頻軟件無法檢測的現(xiàn)象，如站立次數(shù)、理毛次數(shù)、糞粒，跳躍次數(shù)等

5)          視頻采集有原始錄像，保證試驗(yàn)可查性；（軟件可以選擇保存原始錄像，也可以選擇不保存錄像以節(jié)省硬盤空間）

6)          實(shí)驗(yàn)過程自動(dòng)化，避免了人工觀察、計(jì)數(shù)引入的主觀誤差和對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的干擾；

實(shí)驗(yàn)方法

①訓(xùn)練前2 d，撫摸小鼠并將其放入T迷宮適應(yīng)10 min，在迷宮兩臂碗里放入食物，待小鼠取食完畢后將其取出。

②訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)：每一個(gè)trial包括兩個(gè)部分，即forced run和test run。forced run：任意選擇T迷宮的一臂，用木閘門將之關(guān)閉，小鼠只能進(jìn)入一臂獲取食物。取食完畢，立即取出，用酒精清洗去除氣味。15 s后，撤去所有的閘門。Test run：兩臂全部打開，將小鼠放入開始臂中，若小鼠選擇未曾進(jìn)入的臂，為正確選擇，給予食物獎(jiǎng)勵(lì)；若重復(fù)進(jìn)入相同的臂，則為錯(cuò)誤選擇，不給予食物。每只動(dòng)物每天進(jìn)行4個(gè)trial，每次間隔15min，連續(xù)4 d，分別計(jì)算每天每組小鼠的正確率。當(dāng)平均正確率都達(dá)到85％以上，訓(xùn)練階段結(jié)束。T迷宮實(shí)驗(yàn)方法

③測試實(shí)驗(yàn)：延長forced run和test run之間的時(shí)間間隔至1min和3min，分別計(jì)算每組小鼠的正確率。

實(shí)驗(yàn)方法如下：

（1）充分撫摸大鼠 每天1~2min，連續(xù)5~7d。由于大鼠沒有被剝奪進(jìn)食，*對大鼠有驅(qū)動(dòng)作用的是其探究迷宮的欲望。因此，動(dòng)物必須對實(shí)驗(yàn)者和實(shí)驗(yàn)環(huán)境*適應(yīng)，沒有恐懼感。充分觸摸大鼠就顯得尤為重要。

（2）將大鼠放入T-形迷宮的主干臂；打開閘門，讓大鼠離開主干進(jìn)入一個(gè)目標(biāo)臂（四肢進(jìn)入臂內(nèi)）。

（3）將大鼠放回主干臂，限其在臂內(nèi)一段時(shí)間（零倒數(shù)分鐘，但開始時(shí)設(shè)定5s比較合適）。

（4）將第2和第3步的操作重復(fù)9次，記錄進(jìn)入每一臂的次數(shù)。對照大鼠在每一實(shí)驗(yàn)間

期（共10次訓(xùn)練）內(nèi)應(yīng)交替選擇兩目標(biāo)臂。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表述為同一實(shí)驗(yàn)間期內(nèi)交替次數(shù)除以總的選擇次數(shù)。當(dāng)使用藥物或相關(guān)腦區(qū)毀損等方法減弱記憶力時(shí)，這個(gè)比率下降。

（三） 注意事項(xiàng)

1．大鼠和小鼠具有良好的空間辨別功能，能很快學(xué)會(huì)并準(zhǔn)確操作迷宮。因此，T-形迷宮和放射臂迷宮均被廣泛用于測試動(dòng)物的空間記憶能力。T-形迷宮用于研究不同腦區(qū)對空間記憶的影響。它對某些腦結(jié)構(gòu)，尤其是海馬的毀損作用敏感。此外，許多藥物或毒素都可增強(qiáng)或削弱動(dòng)物在T-形迷宮的空間記憶。實(shí)驗(yàn)所用的動(dòng)物除大鼠和小鼠外，還包括豬、羊、烏龜和鴿子等。

2．動(dòng)物選擇的準(zhǔn)確性與兩次選擇之間的間隔及每一訓(xùn)練間期內(nèi)的選擇訓(xùn)練次數(shù)等有關(guān)。正常動(dòng)物經(jīng)短時(shí)間的間隔（例如5s），其選擇準(zhǔn)確性非常高。而經(jīng)過極長時(shí)間的間隔（例如超過1h），其選擇接近隨機(jī)性操作。強(qiáng)迫選擇訓(xùn)練后。如只給一次目標(biāo)臂選擇，準(zhǔn)確性通常很高。但是，如給予多次選擇，則選擇次數(shù)越多，準(zhǔn)確性越差。

3．嚙齒類動(dòng)物有單向偏愛的特性。這種單向偏愛與動(dòng)物種屬和品系有關(guān)。例如，C57BL/6J小鼠、ICR小鼠和Purdue-Wistar大鼠更偏愛左側(cè)，而Spague-Dawley大鼠和Wistar大鼠更偏愛右側(cè)。研究表明，超過2/3的雄性Spague-Dawley大鼠偏愛右側(cè)，而偏愛左側(cè)的不到1/5。這種單向偏愛可影響對動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶的評價(jià)。

4．主干臂的閘門是T-形迷宮的重要特征。它既可用于在兩次選擇之間將動(dòng)物限制在起始箱內(nèi)一定的時(shí)間，也可防止動(dòng)物在兩次選擇訓(xùn)練之間探究迷宮。因此，兩次選擇訓(xùn)練之間應(yīng)將動(dòng)物迅速放回主干臂內(nèi)的起始箱。這一點(diǎn)很重要，它可確保動(dòng)物不會(huì)去探究對側(cè)目標(biāo)臂。

5．當(dāng)動(dòng)物對迷宮或?qū)嶒?yàn)者的應(yīng)激恐懼超過其對探究和覓食的渴望程度時(shí)，動(dòng)物對迷宮的探究減少，甚至呆在迷宮某處不動(dòng)而不去探究迷宮。這種恐懼表現(xiàn)為動(dòng)物在迷宮內(nèi)排便和排尿；當(dāng)抓它時(shí)，動(dòng)物還會(huì)發(fā)出尖叫聲。因此，足夠的應(yīng)激適應(yīng)是必要的。否則，如果動(dòng)物在迷宮內(nèi)不進(jìn)行臂的選擇，就無從得知它的記憶力是正常還是減弱。