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如何讓支原體遠(yuǎn)離你的細(xì)胞
據(jù)粗略估計(jì)，大約三分之一的細(xì)胞培養(yǎng)物都感染了支原體。這些小東西神不知鬼不覺，侵入你的細(xì)胞。由于它們體積小，生長緩慢，所以難以察覺。但是，它們的存在又確實(shí)改變了細(xì)胞的代謝過程，繼而干擾你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，或造成無法解釋的差異。更糟的是，拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此，就支原體污染而言，預(yù)防是**要務(wù)。
細(xì)胞來源是關(guān)鍵
支原體污染的*常見原因之一是引入的培養(yǎng)物已經(jīng)被感染。一旦進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，這些小東西會蔓延到每個角落，讓你崩潰。要避免這種情況，*簡單的辦法就是不從其他實(shí)驗(yàn)室要細(xì)胞，而從供應(yīng)商或菌種保藏中心(ATCC或ECACC)購買，這些細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格檢測，確保不含有支原體。
如果購買有難度，或基于其他原因，不得不使用其他實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞，那么也要保持警惕，在單獨(dú)的培養(yǎng)箱中隔離，同時進(jìn)行支原體的檢測。市場上有多家公司提供支原體檢測試劑盒，你可自行選擇。
定期檢測很重要
即使實(shí)驗(yàn)室沒有新來的細(xì)胞，支原體也可能通過操作人員傳遞到現(xiàn)有的培養(yǎng)物。當(dāng)然，操作人員并不知道。支原體污染的另一條路線是通過你的細(xì)胞培養(yǎng)試劑。培養(yǎng)基、酶這些常用試劑，也有可能被支原體污染。
盡管無法避免人或試劑的污染，但常規(guī)檢測也能避免情況惡化。也許，當(dāng)支原體初次感染時，我們未必能檢測到，但盡早發(fā)現(xiàn)，就能防止這種微生物的傳播，避免大的損失。
支原體檢測有很多種。直接培養(yǎng)方法雖然準(zhǔn)確率高，但需要三到四周的時間。因此，我們在常規(guī)檢測中使用間接檢測方法已足夠，若發(fā)現(xiàn)陽性，則后續(xù)可采用較為繁瑣的直接檢測。常見的間接檢測方法有基于酶活性的熒光和生化分析、PCR分析、**分析等。
無菌操作要做好
支原體污染的另一個主要源頭是無菌操作不佳。盡管良好的操作可能是*簡單的預(yù)防措施，但說起來容易，做起來難。每個人都會犯錯，特別是在重復(fù)勞動時。因此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)不定期開展培訓(xùn)和監(jiān)督，以便讓每個人都充分認(rèn)識到支原體的破壞性。
許多實(shí)驗(yàn)室目前仍使用***，但細(xì)胞培養(yǎng)人員逐漸認(rèn)識到這是不負(fù)責(zé)任的，因?yàn)樗鼛砹四退幬⑸锏膯栴}。相反，*好依賴自身的無菌操作來預(yù)防支原體，而只有在懷疑或確認(rèn)感染的時候才使用***。
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