支原體是最小和最簡dan的自我復制生命體。由于支原體體積小(100 nm),缺乏剛性的細胞壁,因此肉眼無法檢測到支原體,它們可以透過一般過濾膜,并對很多抗生素都具有抵抗力。支原體污染是細胞培養(yǎng)中的一個主要問題,不止影響實驗結果的有效性,更會影響細胞工程制藥的質量和安全性。
支原體的特征:
支原體屬于柔膜菌綱,其成員特征為缺乏細胞壁以及擁有多變的形態(tài)。支原體對包括原代細胞在內(nèi)的所有真核細胞類型具有高度傳染性。成百上千的支原體可以附著在一個細胞上,與細胞膜融合、繁殖,最終數(shù)量可以超過培養(yǎng)細胞1000倍。支原體可以*改變細胞特性和扭曲研究結果。而支原體脂蛋白可被Toll樣受體2(TLR2)識別并激活免疫細胞。支原體沒有細胞壁的特點使它們對常用的抗生素(如青霉素和鏈霉素)產(chǎn)生抗性。此外,它們的尺寸微小(~100nm),能夠穿透過0.2μm的標準過濾膜。因此,我們需要采取預防措施來防止細胞培養(yǎng)物受到污染。
支原體污染對細胞功能的主要影響:
支原體與宿主細胞競爭營養(yǎng)素和代謝物前體。因此,它們能改變許多細胞功能,影響到細胞代謝和細胞生長,最終導致細胞死亡。通過對受污染的人源細胞進行微陣列分析,科學家發(fā)現(xiàn)支原體嚴重影響數(shù)百個基因的表達,當中包括受體、離子通道、生長因子和致癌基因。一旦與宿主細胞膜粘附或融合,支原體可以通過干擾信號級聯(lián)和細胞因子產(chǎn)生,進一步損害細胞。這些有害效應會強烈干擾實驗數(shù)據(jù),導致研究結果無效,特別是當涉及表達TLR2的免疫細胞時,如巨噬細胞。
檢測支原體的 5 大原因:
1.珍貴細胞系的損失
2.對數(shù)據(jù)可靠性和再現(xiàn)性的嚴重影響
3.大多數(shù)學術期刊都要求進行測試
4.全球高達35%的污染率,包括細胞庫
5.時間和金錢的損失
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