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隨著生活水平的提高，食品安全問題受到了人們?cè)絹碓蕉嗟年P(guān)注，其中，微生物污染是食品安全中主要問題之一。微生物的檢測(cè)方法多種多樣，傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法不僅耗時(shí)，檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性受實(shí)驗(yàn)條件的影響也不能得到保障，而近些年得到發(fā)展的快速檢測(cè)方法具有耗時(shí)少、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性也有了一定的提高。下面為大家簡(jiǎn)單介紹幾種快速檢測(cè)微生物的方法。
01/PCR檢測(cè)法
PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，又稱體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。該方法的原理是提取微生物中的DNA，將位于兩段已知序列之間的DNA段落進(jìn)行擴(kuò)增，隨后檢測(cè)擴(kuò)增后的DNA序列或者對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行跑膠分析，從而判斷是否有微生物污染。DNA段落的擴(kuò)增是本方法的核心，其過程類似于天然DNA的復(fù)制過程，主要包括變性、退火、延伸三個(gè)循環(huán)步驟。隨著技術(shù)的發(fā)展，在初的PCR技術(shù)基礎(chǔ)上引進(jìn)了多種技術(shù)，逐漸發(fā)展出多重PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、多重實(shí)時(shí)熒光定量PCR以及PCR-ELISA技術(shù)等。將PCR技術(shù)應(yīng)用于食品微生物的檢測(cè)中，檢測(cè)結(jié)果更加的快速、靈敏、簡(jiǎn)便、高效，并且特異性較強(qiáng)。但是該技術(shù)也存在一定的局限性，即僅對(duì)食品微生物中DNA序列已知的微生物進(jìn)行檢測(cè)。
02/免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)
免疫學(xué)方法是基于抗體和抗原的特異性結(jié)合的原理進(jìn)行檢測(cè)，目前食品研究中廣泛使用的免疫學(xué)方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、酶聯(lián)熒光試驗(yàn)(ELFA)以及免疫磁分離(IMS)。和其他檢測(cè)技術(shù)比較，免疫檢測(cè)技術(shù)使用的設(shè)備簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，實(shí)用性比較強(qiáng)。例如現(xiàn)在食品檢測(cè)中較常用的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)，它是利用抗原和抗體的特異性反應(yīng)，結(jié)合其顏色變化進(jìn)行鑒定，是目前通用的免疫測(cè)定方法。當(dāng)前已有市售的ELISA試劑盒。
03/基因芯片技術(shù)
基因芯片技術(shù)(DNAchip)又稱DNA芯片、DNA微陣列技術(shù),是在20世紀(jì)90年代興起的一種集分子生物學(xué)、生命科學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多個(gè)科學(xué)于一體的技術(shù)。基因芯片是在一塊微小的基片(硅片、玻片、塑料片等)表面集成大量的分子識(shí)別探針，如應(yīng)用已知核酸序列作為探針與互補(bǔ)的靶核苷酸序列雜交，通過對(duì)雜交后信號(hào)的檢測(cè)進(jìn)行定性與定量分析?；诖嗽碓O(shè)計(jì)微生物靶基因信息，并利用基因芯片技術(shù)將探針固化，檢測(cè)人員就可以通過將食品與特定探針進(jìn)行雜交，并對(duì)其雜交信號(hào)進(jìn)行檢測(cè)，只需要一次雜交則可以及時(shí)檢測(cè)出多種靶基因信息，快速檢測(cè)出樣品中的微生物。
該技術(shù)可以同時(shí)對(duì)多個(gè)不同的靶基因進(jìn)行檢測(cè)，具有高通量、特異性好、靈敏度高的特點(diǎn)，在食源性微生物的檢測(cè)方面具有很大的應(yīng)用前景。
04/生物傳感器檢測(cè)技術(shù)
生物傳感器檢測(cè)的原理是把檢測(cè)樣品放入具有生物功能的感應(yīng)元件中，識(shí)別其發(fā)生的生物反應(yīng)，并使用信號(hào)轉(zhuǎn)換器把生物信號(hào)轉(zhuǎn)換成易于傳輸、測(cè)量、處理的電信號(hào)，再經(jīng)檢測(cè)放大器放大輸出，后通過后續(xù)計(jì)算得出微生物種類以及濃度。生物傳感器檢測(cè)技術(shù)可以從源頭檢測(cè)控制食品中微生物情況，目前已在食品微生物毒素、農(nóng)獸藥殘留、不法添加物、食物品質(zhì)等方面得到了廣泛推廣，為有效減少食品的損失起到了巨大作用。
通過人們對(duì)食品微生物的快速檢測(cè)技術(shù)和設(shè)備的研究，檢測(cè)速度和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性都有了很大程度的提高和保障。隨著社會(huì)的發(fā)展和科技的進(jìn)步，將會(huì)有越來越高效、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快捷的檢測(cè)設(shè)備和檢測(cè)技術(shù)被研發(fā)出來，并應(yīng)用于食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域，為人們的食品安全提供強(qiáng)有力的保障。
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