高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng)-萬(wàn)古霉素固定相分離檢測(cè)手性藥物
1. 背景介紹
毛細(xì)管電色譜(CEC)結(jié)合了毛細(xì)管電泳(CE)和高效液相色譜(HPLC)的較佳特點(diǎn):CE 的分離效率高,高效液相色譜的多選擇性和大樣本容量。近年來(lái),對(duì)映體的分離受到了廣泛關(guān)注,許多 HPLC 中常見(jiàn)的手性固定相被用在CEC 中,例如環(huán)糊精、纖維素、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素、陰離子交換型固定相和分子印跡聚合物等。然而,當(dāng)在沒(méi)有壓力的情況下使用 CEC 時(shí),特別是對(duì)于填充柱,仍然存在與氣泡形成和柱干涸相關(guān)的問(wèn)題和困難,在開(kāi)管和整體柱中不會(huì)出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。熔融玻璃管壁似乎是形成氣泡的重要因素。對(duì)于填充柱中出現(xiàn)的氣泡和柱干涸的問(wèn)題,可以通過(guò)高效微流電動(dòng)液相色譜(eHPLC)系統(tǒng)解決, 其流動(dòng)相由壓力流和電滲流(EOF)共同驅(qū)動(dòng)。
在 eHPLC 系統(tǒng)中,可以在毛細(xì)管色譜柱的出口端和進(jìn)口端施加一個(gè)大于 1000 psi 的壓力,這樣就可以避免在使用 CEC 模式時(shí)出現(xiàn)氣泡和柱干涸等問(wèn)題。同時(shí),eHPLC 系統(tǒng)中樣品可通過(guò)旋轉(zhuǎn)式注射器實(shí)現(xiàn)定量引入。另外,EOF 可以與整個(gè)流動(dòng)相的方向相同或相反,因此可以影響樣品洗脫順序。更重要的是 EOF 適用于梯度洗脫模式。因此,通過(guò)eHPLC 系統(tǒng),CEC 的優(yōu)勢(shì)可以充分的實(shí)現(xiàn)。
我們選取一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素-萬(wàn)古霉素作為手性固定相,建立了 eHPLC 系統(tǒng)分離檢測(cè)手性藥物的方法。
2. 測(cè)試條件
儀器: | TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng) |
3. 測(cè)試結(jié)果
圖 1 高效微流電動(dòng)液相色譜法(實(shí)線(xiàn))和毛細(xì)管液相色譜法(虛線(xiàn))檢測(cè)手性藥物色譜圖
注: a 異丙嗪;b 卡替洛爾; c 塞利洛爾;d 沙丁胺醇
4. 結(jié)論
采用 TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng),并在有機(jī)相中加入萬(wàn)古霉素做手性固定相,可實(shí)現(xiàn)異丙嗪、 卡替洛爾、塞利洛爾和沙丁胺醇的分離檢測(cè)。并且得到,在相同的條件下,高效微流電動(dòng)液相色譜法的效率和分辨率高于毛細(xì)管液相色譜法。
5. 配置列表
儀器配置 | TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng)(配二元梯度泵、柱溫箱、UV 檢測(cè)器、高壓電源、自動(dòng)進(jìn)樣器、微流控、控制器) |
Clarity Lite 色譜工作站 |
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