ELISA實驗看似簡單,其實不然。記得以前一個同學*次做ELISA實驗,跟我說,ELISA實驗簡直太簡單了,到第2次在次做ELISA實驗的時候,他驚訝了,說結(jié)果差別怎么這么大(同一份標本),第三次的時候,他決定認真的做一次,爭取做到同一份標本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單,發(fā)覺其實挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧,希望對大家有所幫助!
1.操作前應對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結(jié)果錯誤,實驗重復性差。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應孑L內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
ELISA試劑盒的影響因素應選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時應先檢查是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導致錯誤結(jié)果。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。