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更新時(shí)間:2024-10-10 08:49:01瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)ELISA檢測(cè)簡(jiǎn)介
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)是一種常用的免疫分析技術(shù),它利用抗體與抗原的特異性結(jié)合,通過(guò)酶標(biāo)記的二抗放大信號(hào),實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的定量分析。ELISA廣泛應(yīng)用于臨床診斷、生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開發(fā)和流行病學(xué)調(diào)查等領(lǐng)域。
ELISA檢測(cè)服務(wù)的類型
ELISA有幾種不同的類型,包括直接法、間接法、夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法等。直接法涉及直接將酶標(biāo)記的抗體與抗原結(jié)合;間接法則使用未標(biāo)記的抗體首先與抗原結(jié)合,然后使用酶標(biāo)記的二抗進(jìn)行檢測(cè);夾心法使用兩種抗體夾持抗原,形成三明治結(jié)構(gòu);競(jìng)爭(zhēng)法則是基于抗原與其抗體結(jié)合的可逆性,通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制來(lái)檢測(cè)抗原或抗體的存在。
ELISA檢測(cè)服務(wù)的操作要點(diǎn)
進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí),需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn):
1.標(biāo)本的采取和保存:血清是zui常用的ELISA檢測(cè)標(biāo)本,應(yīng)避免溶血和細(xì)菌污染,新鮮血清應(yīng)盡快檢測(cè),如需保存,應(yīng)在4℃下進(jìn)行,并注意避免反復(fù)凍融。
2.試劑的準(zhǔn)備:使用新鮮的蒸餾水或去離子水,并確保自配的緩沖液pH值準(zhǔn)確。從冰箱中取出的試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫后使用。
3.加樣:加標(biāo)本、酶結(jié)合物和底物時(shí)應(yīng)避免濺出和產(chǎn)生氣泡,使用微量加樣器或定量塑料管進(jìn)行加樣。
4.保溫:抗原抗體反應(yīng)需要在適宜的溫度下進(jìn)行溫育,以確保反應(yīng)充分進(jìn)行。通常在37℃下進(jìn)行1-2小時(shí)。
ELISA檢測(cè)的應(yīng)用實(shí)例
ELISA檢測(cè)在實(shí)際應(yīng)用中展現(xiàn)了其多樣性和靈活性。例如,最近的研究建立了一種針對(duì)犬腺病毒1型(Canine adenovirus type 1, CAdV-1)的ELISA方法,該方法在臨床樣本中的靈敏度和特異性分別為93.75%和90.9%,顯示出與實(shí)時(shí)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)相比的良好性能。此外,ELISA也被用于開發(fā)新型的病原體核酸檢測(cè)方法,這種方法結(jié)合了核酸雜交和免疫分析技術(shù),能夠在無(wú)需分子操作和高級(jí)儀器的情況下檢測(cè)病原體teyou的RNA。
結(jié)論
ELISA檢測(cè)因其簡(jiǎn)便、靈敏和經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。掌握正確的操作技巧和注意事項(xiàng)對(duì)于獲得準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果至關(guān)重要。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,ELISA檢測(cè)的應(yīng)用范圍和準(zhǔn)確性有望進(jìn)一步擴(kuò)大和提高。
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