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穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

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更新時間:2022-12-22 18:44:39瀏覽次數(shù):810次

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穩(wěn)定細(xì)胞株篩選:通過慢病毒感染配合藥物篩選的方法獲得穩(wěn)定表達(dá)Oct-4-EGFP的LELA穩(wěn)定細(xì)胞株。

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實驗原理:外源基因在細(xì)胞中的表達(dá)可分為兩大類,一類是瞬時表達(dá),一類是穩(wěn)定表達(dá)(又叫長久表達(dá))。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上,使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因。建立穩(wěn)定細(xì)胞株,一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的**對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選實驗流程1、載體構(gòu)建(表達(dá)質(zhì)粒載體、病毒載體);2、轉(zhuǎn)染/感染;3、目的蛋白初步檢測;4、***篩選;5、目的蛋白再次檢測(定性/半定量);6、單克隆細(xì)胞株穩(wěn)定性檢測。四、 客戶提供培養(yǎng)好的細(xì)胞五、 公司提供:基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株實驗周期:大約3-4月左右,具體需要根據(jù)細(xì)胞實驗內(nèi)容而定。

公司位于上海長江軟件園,目前具備較好的的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。

我們擁有專業(yè)的實驗室、先進(jìn)的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。

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