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生命安防,如此之近——盡在奇妙萬千的免疫實(shí)驗(yàn)室
作為生命科學(xué)的重要分支,動(dòng)物科學(xué)的基本任務(wù)是在認(rèn)識(shí)和掌握動(dòng)物遺傳變異、生長發(fā)育、免疫學(xué)、繁殖消化代謝等生命規(guī)律的基礎(chǔ)上,為人類提供質(zhì)優(yōu)量多的動(dòng)物產(chǎn)品。而其中的免疫學(xué)研究對(duì)于貫穿整個(gè)動(dòng)物科學(xué)起到了中樞紐帶的作用。
談到免疫學(xué),映入大家腦海中的一定是生物體抵抗各種細(xì)菌和病毒的場(chǎng)景,沒錯(cuò),大家的直覺很有道理!其實(shí),免疫學(xué)是一門研究生物體對(duì)抗原物質(zhì)免疫應(yīng)答性及其方法的重要科學(xué),也是各種生物疾病防治的基礎(chǔ)。小O同學(xué)對(duì)此也一直甚有興趣,恰巧今天有幸跟免疫實(shí)驗(yàn)室來一場(chǎng)近距離接觸,快來一起看看吧!
趣味源自深?yuàn)W之免疫實(shí)驗(yàn)室
我們要參觀的是位于我國東南沿海地區(qū)的一所農(nóng)林高校,這是全國建校早的農(nóng)林院校之一,也是福建省重點(diǎn)建設(shè)3所高水平大學(xué)之一,小O同學(xué)將帶領(lǐng)大家在神秘的動(dòng)物科學(xué)學(xué)院開啟我們的發(fā)現(xiàn)之旅。
在動(dòng)物科學(xué)的免疫學(xué)研究中,酶免疫測(cè)定(Enzyme Immunoassay,EIA)是一種對(duì)液相內(nèi)微量物質(zhì)至關(guān)重要的測(cè)定技術(shù),其分為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)和酶免疫組化技術(shù),前者用于測(cè)定可溶性抗原或抗體,后者用于測(cè)定組織或細(xì)胞表面的抗原。我們要講的故事將圍繞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)展開。
ELISA是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣的技術(shù),其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法、直接法、間接法等。接下來,實(shí)驗(yàn)室的老師將采用檢測(cè)抗體常用的間接法為你展示精彩的ELISA實(shí)驗(yàn)。
首先,抽取雞的新鮮血液,離心后取上清液,并使用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)進(jìn)行1:100的稀釋,靜置;
接下來,進(jìn)行包被抗原,即將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原,保持4℃過夜孵育,然后加入5%的脫脂奶粉進(jìn)行封閉,洗滌三次,除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì);
第三步,加入待檢血清(一抗),保持37℃孵育1小時(shí),之后加入PBS在室溫條件下進(jìn)行5分鐘的洗滌,拋干;
第四步,加入酶標(biāo)抗體(二抗),保持37℃孵育1小時(shí),之后加入PBS在室溫條件下進(jìn)行5分鐘的洗滌,拋干;
后,加入底物顯色,保持37℃反應(yīng)30分鐘,并加入2 mol的硫酸溶液進(jìn)行終止。然后就可以用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值(光密度),并計(jì)算出P/N比值(陽性血清與陰性血清之比)。
實(shí)驗(yàn)的主義者——奧豪斯微孔板搖床
在整個(gè)ELISA實(shí)驗(yàn)過程中,有多個(gè)過程需要進(jìn)行搖蕩混勻的操作,首先是樣品和試劑的混勻,包括稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以實(shí)驗(yàn)的持久性和均一性;其次是洗板洗滌的過程,需要將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)孵育過程中吸附的非特異成份分離開來,以ELISA測(cè)定的特異性。洗板對(duì)于整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程也是關(guān)鍵的一步,洗液盡量不要溢出孔外,這就對(duì)于搖蕩的穩(wěn)定性有很高的要求。
之前該實(shí)驗(yàn)室采用的搖蕩混勻方法效果欠佳,尤其是穩(wěn)定性和可控性不能,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)樣品稀釋地不均勻,或在洗滌過程中由于設(shè)備振動(dòng)發(fā)生洗液濺出孔外的現(xiàn)象,從而造成操作臺(tái)污染。這對(duì)于敏感性和清潔性要求很高的ELISA實(shí)驗(yàn)顯然是不能接受的。
潛移默化源于親密接觸。一切陳舊糟糕的實(shí)驗(yàn)效果自一個(gè)身手敏捷的小家伙初次光臨實(shí)驗(yàn)室的那天起戛然而止,可不要小瞧,它不光極大地提高了環(huán)境適應(yīng)性,更重要的是有效地保障了實(shí)驗(yàn)安全性,帶來的“化學(xué)反應(yīng)”都令實(shí)驗(yàn)室的工作人員們嘆為觀止。看到下面這臺(tái)儀器了嗎?沒錯(cuò),我們說的就是它——奧豪斯數(shù)顯控制輕負(fù)載微孔板搖床!
扁平的機(jī)身設(shè)計(jì)占用空間更少,可輕松放入大多數(shù)通風(fēng)櫥或培養(yǎng)箱,橡膠吸盤基座提供了更高的耐久性和穩(wěn)定性。同時(shí),反應(yīng)靈敏的“神經(jīng)中樞”——微處理控制器和功能強(qiáng)大的心臟——三偏心軸平衡驅(qū)動(dòng)的無刷直流電機(jī)能夠確保一致均勻的搖蕩動(dòng)作可靠運(yùn)行,并對(duì)搖蕩過程中任何突發(fā)情況進(jìn)行靈活有效的應(yīng)變。尤其是緩慢升速設(shè)計(jì)能將速度緩慢安全地提升至目標(biāo)設(shè)定值,以免微孔板的樣品濺出;另外,當(dāng)系統(tǒng)檢測(cè)到障礙物或托盤過載時(shí),將發(fā)出聲光信號(hào)警報(bào)。整款產(chǎn)品的智能性大大提高了實(shí)驗(yàn)的自主權(quán),從而節(jié)約了人工輔助操作的成本。
俗話說,工欲善其事,必先利其器。一臺(tái)性能的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備對(duì)順暢的實(shí)驗(yàn)流程可是至關(guān)重要。如果您想了解更多搖床系列或奧豪斯其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的產(chǎn)品信息,或正在尋求更專業(yè)細(xì)致的選型指導(dǎo),請(qǐng)速速聯(lián)絡(luò)我們,我們專業(yè)的工程師們歡迎隨時(shí)來騷擾哦!