細(xì)胞轉(zhuǎn)染是外源基因進(jìn)入真核細(xì)胞的一種重要方法。這些外源DNA或RNA通過轉(zhuǎn)染試劑的包裝輔助才能順利進(jìn)入細(xì)胞,發(fā)揮相應(yīng)的作用,進(jìn)而研究其細(xì)胞功能及相應(yīng)的影響。廣泛應(yīng)用于基因功能研究、調(diào)控基因表達(dá)、癌癥、疾病模型相關(guān)研究和重組蛋白研究等生物學(xué)試驗。那么你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的作用機(jī)制是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑是一種用于將外源核酸(如DNA、RNA)傳遞到細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)。其作用機(jī)制可以概述為細(xì)胞膜穿透機(jī)制和核酸釋放機(jī)制。
一、細(xì)胞膜穿透機(jī)制
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可以通過不同的機(jī)制穿透細(xì)胞膜,從而將外源核酸傳遞到細(xì)胞內(nèi)。其中常見的機(jī)制包括:
1.離子共價結(jié)合:轉(zhuǎn)染試劑可以與DNA或RNA形成帶電復(fù)合物,利用復(fù)合物與細(xì)胞膜上的負(fù)電荷之間的吸引作用來穿過細(xì)胞膜。
2.脂質(zhì)體介導(dǎo):某些轉(zhuǎn)染試劑是由脂質(zhì)體組成的,脂質(zhì)體與細(xì)胞膜融合后將載體內(nèi)的核酸釋放到細(xì)胞內(nèi)。
3.蛋白質(zhì)介導(dǎo):一些轉(zhuǎn)染試劑可以與核酸形成蛋白質(zhì)/核酸復(fù)合物,利用細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)受體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)。
二、核酸釋放機(jī)制
一旦轉(zhuǎn)染試劑穿透了細(xì)胞膜,核酸需要被釋放到細(xì)胞質(zhì)中,以發(fā)揮其功能。
1.破壞性釋放:某些轉(zhuǎn)染試劑通過破碎或破壞載體來釋放核酸到細(xì)胞質(zhì)中。
2.溫和釋放:溫和的轉(zhuǎn)染試劑可以保護(hù)載體,通過一些不同的刺激來使核酸滲透出轉(zhuǎn)染試劑,進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。
3.胞吞作用:某些轉(zhuǎn)染試劑可以促進(jìn)細(xì)胞膜的內(nèi)胞吞作用,將溶液及其中的核酸引入細(xì)胞質(zhì)。
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