免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)是基于抗原抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色來對組織內(nèi)抗原進行定位、定性、定量的一項技術。那么你知道免疫組化實驗的分類與應用嗎?讓我們一起來看看吧!
一、分類
根據(jù)抗體標記物的不同一般分為免疫酶標法、免疫熒光法、親和組織化學法、免疫鐵蛋白法、免疫金法、放射免疫自影法。下面介紹兩種較為常用的兩種技術:
(1)免疫熒光法
免疫熒光法是最早建立的免疫組織學技術。將已知抗體標上熒光素,以此作為探針,檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,從而對組織中的抗原進行定位或定量。
(2)免疫酶標法
免疫酶標法是繼免疫熒光之后發(fā)展的應用較為廣泛的免疫組化技術。先以酶標記的抗體作用于組織或細胞,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物質(zhì)或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對其進行定位,從而對細胞內(nèi)抗原進行定位或定性研究的一種方法。
二、應用
IHC的原理是通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原,對其進行定位、定性及定量的研究。人體內(nèi)很多器官和組織內(nèi)的組成細胞,由于起源一致,在形態(tài)結構上非常相似,很多時候是很難靠形態(tài)來區(qū)分。在過去沒有免疫組化的情況下,識別有很強的主觀性,錯誤難以避免。免疫組化就像細胞的“血型"鑒定,靠它可以明確組織來源。由于免疫組化具有特異性強、靈敏度高、定位準確等特點,且能將形態(tài)研究與功能研究有機結合在一起,所以這門新技術已被廣泛應用于生物學和醫(yī)學研究的許多領域。免疫組化在病理學診斷中的應用主要包括:
(1)確定細胞類型
(2)辨認細胞產(chǎn)物
(3)了解分化程度
(4)鑒定病變性質(zhì)
(5)探討腫瘤起源或分化表型
(6)確定腫瘤分期等
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