OmnimABs 進口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。
不同批次OmnimABs 進口胎牛血清對細胞生長的促進作用不同大規(guī)模細胞培養(yǎng)中由血清引起的細胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾方面:
1、細胞生長速度緩慢,長滿單層時間長:從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞,用同一種培養(yǎng)液,分別加入 10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培養(yǎng) 72小時,會出現(xiàn)對照血清長滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細胞。
2、細胞傳代后形態(tài)不正常,細胞狀態(tài)發(fā)生變化:由于血清的質(zhì)量問題,使原本狀態(tài)正需的細胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差;比如:細胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點(并非污染),或者細胞表面形成一層油狀覆蓋物;細胞的輪廓變得模糊,細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細胞向四周擴展生長。
3、細胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子,會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細胞會從正常的貼壁狀態(tài),邊緣開始腐壞,上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細胞表面不光滑,晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動。隨著傳代次數(shù)增加,細胞腐壞的情況越來越嚴重,直到終*脫壁而死亡。
4、細胞長的很好,致密的單層,狀態(tài)也很正常,但是接毒后細胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因為血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,如果存在這些抗體,就會把接進去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,病毒會被抗體*中和,就沒有病毒顆粒在細胞中增殖,所以會檢測不到病毒滴度。
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