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液相色譜柱的“不凡”，你知道多少？
色譜柱在液相系統(tǒng)中起著分離的作用，是液相色譜系統(tǒng)的部件之一。柱管材質(zhì)有玻璃、不銹鋼、鋁銅、peek以及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他材質(zhì)。一般細(xì)粒度的填料采用勻漿填充法裝柱，先將填料調(diào)成勻漿，在高壓泵作用下，快速將其壓入裝有洗脫液的色譜柱內(nèi)，經(jīng)沖洗后備用。
上學(xué)的時(shí)候也裝過(guò)層析柱，由于技術(shù)不過(guò)關(guān)，裝出來(lái)的柱子里面經(jīng)常有氣泡，實(shí)驗(yàn)效果不好。柱子裝填的效果對(duì)柱效影響很大。如何使用色譜柱使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，這就需要對(duì)色譜柱做一下深入的了解了。
一般的液相色譜柱由柱管、柱頭螺母、死堵、篩板、還有里面的填料組成。不同品牌的構(gòu)造略有不
柱的分類2液相色譜柱分類多樣主要有以下分類方式
按照固定相基質(zhì)分：
無(wú)機(jī)氧化物（常用硅膠、氧化鋁）、聚合物基質(zhì)（常用DVB、PS-DVB、PHAM等）和全石墨化碳色譜柱等。
按結(jié)構(gòu)和形狀分：
全多孔硅膠柱和核殼柱，無(wú)定型和球形，整體柱。
按分離模式分：
正相、反相、離子交換、體積排阻、親和、手性等。
按照分離規(guī)模和色譜柱尺寸分：
制備柱、分析柱、微型柱、毛細(xì)管柱等。
色譜柱的類型和構(gòu)型（粒徑、內(nèi)徑、長(zhǎng)度、碳載量、孔徑等）選擇通常有分離的目的決定，對(duì)特定類型的色譜柱，不同品牌不同系列之間差異很大。
表征色譜柱性能的參數(shù)主要有：理論塔板數(shù)、不對(duì)稱因子、對(duì)兩種不同溶質(zhì)的選擇性、色譜柱的反壓、保留時(shí)間的重現(xiàn)性、鍵和相濃度、色譜柱的穩(wěn)定性等。一般色譜柱出廠COA報(bào)告包含其中比較關(guān)鍵的項(xiàng)目。
我們常見(jiàn)的色譜柱品牌有waters、安捷倫、賽默飛、島津、shodex、大賽璐、還有被大曹三耀收購(gòu)的資生堂，國(guó)內(nèi)品牌比較出名的就是月旭、依利特了。
我們?cè)倏纯锤鞣N各樣的鍵和相都是啥
這么多的鍵和相到底應(yīng)該怎么選，有沒(méi)有規(guī)律呢，必須有啊，往下瞅瞅~
又想起了化學(xué)老師那句的箴言：“結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)，性質(zhì)決定用途。”結(jié)構(gòu)和性質(zhì)還決定了這伙計(jì)需要用什么柱子分離。
了解被分離物有何區(qū)別？有無(wú)可電離集團(tuán)？電離常數(shù)？PH如何影響色譜分析？比如下圖ＰＨ對(duì)分離的影響。
常規(guī)的硅膠基質(zhì)色譜柱不能耐受高PH，可以選擇雜化硅膠顆?；蛘呔酆衔锘|(zhì)的色譜柱，多點(diǎn)鍵和的色譜柱在高PH下也會(huì)比單點(diǎn)鍵和的色譜柱壽命更長(zhǎng)。下圖便是某位小姐姐家的色譜柱在高PH下硅膠溶解的圖片。
１、拿到色譜柱后先閱讀說(shuō)明書，了解色譜柱的具體性能：耐受溫度、耐受ＰＨ等。以及色譜柱的沖洗和保存條件。經(jīng)過(guò)柱校測(cè)試確認(rèn)色譜柱本身沒(méi)有問(wèn)題后方可正常使用。
２、樣品充分前處理，確保樣品的潔凈；使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器，根據(jù)實(shí)際情況更換保護(hù)柱芯或?yàn)V片。
３、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。
４、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽，避免出現(xiàn)鹽析。
５、選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是PH），以避免固定相被破壞，PH過(guò)低共價(jià)鍵斷裂，鍵和相水解；PH過(guò)高硅膠溶解。
６、色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升高，或出現(xiàn)污染，選擇適當(dāng)?shù)臈l件沖洗或反沖。
適用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等
使用至少20倍柱體積的含有≥30誰(shuí)的極性郵寄溶劑（如乙腈）作為流動(dòng)相除去柱子中的緩沖鹽；使用至少20倍柱體積的含有95%極性郵寄溶劑（如乙腈）沖洗色譜柱。
污染物的去除常規(guī)星期后柱校沒(méi)有明顯恢復(fù)時(shí)，使用50異丙醇／乙腈以低流速清洗20倍柱體積以除去污染物。（以上操作可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽默飛針對(duì)自己品牌的反相色譜柱沖洗的參考意見(jiàn)）
適用于氨基柱、氰基柱
常規(guī)清洗：乙腈：水＝60:40條件對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗，清洗時(shí)不建議水相比例超過(guò)40%，過(guò)高使用水相容易導(dǎo)致鍵和相水解。
色譜柱再生：當(dāng)色譜柱經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期使用，柱校降低時(shí)，可以對(duì)色譜柱進(jìn)行再生，乙腈：水（水中加入0.05%氨水）＝60:40條件沖洗30倍柱體積。（以上操作可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽默飛針對(duì)自己品牌的色譜柱沖洗的參考意見(jiàn)）
適用于離子交換柱SCX、SAX沖洗方法
日常沖洗：用100水沖洗30個(gè)柱體積除鹽，然后用20甲醇或乙腈沖洗20個(gè)柱體積后保存在20甲醇或乙腈中。
長(zhǎng)期保存：用100水沖洗30個(gè)柱體積去除鹽，然后用50%乙腈；50水沖洗20個(gè)柱體積后保存在50乙腈：50水中。
再生：先用高濃度的緩沖鹽（不超過(guò)１Ｍ），然后再用100%水洗，100乙腈或甲醇沖洗，再用20%乙腈或甲醇保存。（以上操作可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽默飛針對(duì)自己品牌的色譜柱沖洗的參考意見(jiàn)）