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當(dāng)前位置:上海淳麥生物科技有限公司>>細(xì)胞庫>>細(xì)胞系/株>> IM-M060LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞(種屬鑒定正確)

LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞(種屬鑒定正確)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號IM-M060

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地

更新時間:2023-11-25 08:22:26瀏覽次數(shù):101次

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LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞(種屬鑒定正確) Mouse Lung Cancer Cells貨號:IM-M060 來源:ATCC規(guī)格:1×106cells/T25或1mL凍存管 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,半貼壁生長培養(yǎng)基:90% DMEM+10% FBS+PS傳代比例:1:2至1:3 每周3次 價格:1200元

LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞生長記錄

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱LLC;LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/2; LL2; LLC1; Lewis lung carcinoma line 1; Lewis lung carcinoma; Lewis-Lung; Lewis Lung;小鼠肺癌細(xì)胞
種屬來源小鼠
組織來源
生長特性半貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景簡介LLC細(xì)胞是小鼠Lewis肺癌細(xì)胞。
細(xì)胞代數(shù)10代以內(nèi)
生物安全等級1
細(xì)胞規(guī)格1×106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測
保藏機(jī)構(gòu)ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050 BCRJ; 0145 ECACC;
培養(yǎng)基90% DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
致瘤性Yes, in C57BL mice.
抗原表達(dá)情況H-2b
細(xì)胞貨期現(xiàn)貨,1周左右
發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應(yīng)限制于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
初步平衡用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,放37度培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)無須平衡,直接放入-80冰箱(不超過一周)或者液氮罐保存,建議盡早復(fù)蘇
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例 傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法
a、收集細(xì)胞培養(yǎng)上清:抽出瓶中的培養(yǎng)基和懸浮的細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清,細(xì)胞重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。
b、剩下貼壁的細(xì)胞,用不含鈣、鎂離子的PBS輕輕潤洗細(xì)胞1次。
c、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
d、按3mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻吹下細(xì)胞后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
e、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)中。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2.因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存;
2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
備注:客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時給予解答。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞密度待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
四、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā);
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);
6.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);
5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);
7.視具體情況而定。

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