培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。
細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
線粒體復(fù)合物III蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次
載玻細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
冰凍切組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
石蠟切組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
乳酸乳球菌葉蟬亞種價(jià)格RNF133 環(huán)指蛋白133抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-RGS19(Ser22) 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1ml
HCMV UL23 人巨細(xì)胞病毒UL23抗體 規(guī)格: 0.1ml
SAP/Serum Amyloid P 清淀粉樣蛋白P成份抗體 規(guī)格: 0.1ml
AIF1/IBa-1 離子鈣接蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
LHR/CGR 促黃體生成素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
EML4/C2orf180 限制過度增相關(guān)蛋白EML4抗體 規(guī)格: 0.2ml
TSLP (human) 胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素-1抗體(人) 規(guī)格: 0.2ml
CBFb/PEBP2B 多瘤病毒增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CD19(Ser227) 磷酸化CD19抗體 0.1ml
LAMP-1/CD107a/LAMPA 溶體相關(guān)膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Geminin DNA復(fù)制抑制因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
RAR α 維甲酸受體-α 抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cystatin D 胱抑素D/半抑制劑D抗體 規(guī)格: 0.2ml