詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
2.組織來源:外周血
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
大鼠外周血DC細(xì)胞分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中*提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年*在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
本公司生產(chǎn)的大鼠外周血DC細(xì)胞采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞純度可達(dá)85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
RPMI-1640、FBS、樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R185)作為體外培養(yǎng)大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)的培養(yǎng)基。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對(duì)原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,以便售后處理。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后