目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司>>細胞分類>>細胞系>> AML12AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
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貨號 | AML12 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 科研使用 |
AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
AML12細胞從一只轉(zhuǎn)入人TGF alpha的轉(zhuǎn)基因小鼠肝實質(zhì)細胞獲得。該細胞表達較高水平的人TGF alpha 以及較低水平的鼠TGF alpha。肝臟特異性蛋白的表達隨著培養(yǎng)時間的延長而降低,但是可在無血清培養(yǎng)基中重新激活。
細胞特性
1)來源:小鼠肝臟
2)形態(tài):上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
(1)使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。
(2)收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
AML12 小鼠肝細胞/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備DMEM: Ham's F12(1:1)培養(yǎng)基(添加0.005 mg/ml 牛胰島素, 0.005 mg/ml 轉(zhuǎn)鐵蛋白, 5 ng/ml 硒, 以及 40 ng/ml 地塞米松),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶定制服務(wù)等
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