目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>表達(dá) 感受態(tài)細(xì)胞>> ABG714-50MaV203 酵母感受態(tài)細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-03-28 14:49:11瀏覽次數(shù):696評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50X100ul |
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貨號(hào) | ABG714-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
主要用途 | 感受態(tài)細(xì)胞 |
基因型
MATα; leu2-3,112; trp-901; his3Δ200; ade2-101;cyh2R;can1R ; gal4Δ; gal8Δ; GAL1::lacZ;HIS3UASGAL1::HIS3@LYS2; SPAL10::URA3
簡(jiǎn)要說明:
MAV203菌株是life公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株,MATα型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒操作進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)。MAV203有四個(gè)報(bào)告基因:Ura,HIS,Trp,Leu。MAV203感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μgDNA。
操作說明
1、取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3µg,Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴,重復(fù)一次),100µl冰上融化的感受態(tài)細(xì)胞,PEG/LiAc 500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
2. 30℃水浴30min,每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
3. 每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,可不做)
4. 42℃水浴15min,每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
5. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,每支加入1ml的YPDPlus于30℃復(fù)蘇1h;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,可不做)
6. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養(yǎng)48-96h。
注意事項(xiàng)
1、感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
2. PEG溶液在低溫環(huán)境下會(huì)析出,請(qǐng)于常溫下溶解后使用。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)