詳細(xì)介紹
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4傳代方法培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4傳代方法冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品名稱 | 形態(tài)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
淋巴母細(xì)胞樣 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4傳代方法
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 MOLT-4與MOLT-3來源于一名19歲的男性急性淋巴細(xì)胞性白血病的復(fù)發(fā)患者,該患者前期接受過多種藥物聯(lián)合化療。MOLT-4細(xì)胞系為T淋巴細(xì)胞起源,p53基因的第248位密碼子有一個G→A突變,不表達(dá)p53,不表達(dá)免疫球蛋白或EB病毒;可產(chǎn)生高水平的末端脫氧核糖轉(zhuǎn)移酶;表達(dá)CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C12
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4傳代方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
23-0510-10 Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 ) 10g
23-0520-5 Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 ) 5mg
23-0530-1 NS-2028(sGC 抑制劑 ) 1mg
23-0540-1 NS-398(COX-2 抑制劑 ) 1mg
23-0550-1 Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 ) 1mg
23-0560-10 Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 ) 10μg
23-0570-100 Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 ) 100μL
23-0580-2 PD 98059(MAPKK 抑制劑 ) 2mg
23-0590-1 PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 1g
23-0600-1 Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
23-0610-5 Pifithrin-a(p53 抑制劑 ) 5mg
23-0620-1 PMA/TPA (PKC 激活劑 ) 1mg