背景資料:DNA methylation is the major modification of eukaryotic omes and plays an essential role in mammalian development. Human proteins MECP2, MBD1, MBD2, MBD3, and MBD4 comprise a family of nuclear proteins related by the presence in each of a methyl-CpG binding domain (MBD).
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
MBD2抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:MBD2
中文名稱 去甲基化酶MBD2抗體
英文別名 Demethylase; DMTase; MBD 2; MBD2_HUMAN; MBD2a; Methyl CpG binding domain protein 2; Methyl CpG binding protein MBD2; Methyl-CpG-binding domain protein 2; Methyl-CpG-binding protein MBD2; NY CO 41.
交叉反應:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow
標記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MBD2
蛋白細胞定位: 細胞核
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one y
抗體制備過程:
1.
材料與試劑
a
.提取的動物 Ig
b
.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d
.實驗動物 兔
e
.其它材料及試劑
2
、選擇實驗活體。3
、進行動物免疫實驗。4
、試取血樣進行測試,查看免疫效果。5
、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。6
、純化出抗體。7
、鑒定抗體。
相關產(chǎn)品:5
號染色體開放閱讀框33抗體 Anti-C5ORF33 100ul
8號染色體開放閱讀框4抗體 Anti-C8orf4 100ul
中性粒細胞殺菌蛋白BP30抗體 Anti-CAP57 100ul
親環(huán)蛋白40抗體 Anti-Cyclophilin 40 100ul
9號染色體開放閱讀框152抗體 Anti-C9orf152 100ul
抗體的制備過程:
1.
免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2.
免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3.
免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4.
免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5.
免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標記法:
直接標記法 | 間接標記法 |
抗體的準備:取提純的Ig溶液測定蛋白質(zhì)含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min;
熒光素的準備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計算,準確稱取后加入抗體溶液中;
標記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續(xù)攪拌12~18h;
透析:結(jié)合完畢后,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜;
過柱:取透析過夜的標記物,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游
| 抗體的準備:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶內(nèi)放入冰槽中;
熒光素的準備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分攪勻;
透析或過柱層析。
|
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
SIM1
: 轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體 0.2ml
FoxP3: 叉頭蛋白P3抗體 0.1ml
鼠抗人心肌肌凝蛋白單抗 Anti-Myosin 0.2ml
Anti-sFRP/FITC 熒光素標記抗子宮內(nèi)膜抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PAR4 (Thr163) 0酸化活化受體4抗體 規(guī)格 0.1ml
14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris)) 植物14-3-3蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠髓過氧化物酶(MPO)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,MPO ELISA Kit
小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA檢測試劑盒MouseOncostatin-M,OSMELISAKIT 96T/48T
人谷脫羧酶(GAD)免疫試劑盒 Human glamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit
Ratglucocoicoid,GCELISAKit大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)酶聯(lián)免疫試劑盒
AP穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
MousehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAg酶聯(lián)免疫試劑盒小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)酶聯(lián)免疫試劑盒
MBD2抗體熒光假單胞菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pseudomonas fluorescensPCR 50T
隱襲腐霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pythium insidiosumPCR 50T
異源曼氏桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mannheimia varigenaPCR 50T
胰闊圓盤吸蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Eurytrema pancreaticumPCR 50T
公司專業(yè)供應的抗體,是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。