背景資料:Dynamin I is a GTPase enzyme required for the retrieval of synaptic vesicles after exocytosis and functions in endocytosis by stimulating assembly of invaginating synaptic vesicles (1). Dynamin I is phosphorylated in nerve terminals exclusively in the cytosolic compartment and in vitro by protein kinase C (PKC) (2–5). The phosphorylation site in PKC-phosphorylated Dynamin I is a single site at Serine 795, which is located near a binding site for the SH3 domain of p85, the regulatory subunit of phosphatidylinositol 3-kinase (2–5). Dephosphorylation is required for synaptic vesicle retrieval, suggesting that phosphorylation affects the subcellular localization of Dynamin I (5). Mouse, rat and human Dynamin I are phosphorylated on serine residues, including Ser 778, by Cdk5, regulating PACSIN1 recruitment and enabling synaptic vesicle endocytosis.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
phospho-Dynamin 1 (Ser778)抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:phospho-Dynamin 1 (Ser778)
中文名稱 磷酸化酶動(dòng)力蛋白1抗體
英文別名 Dynamin 1 (phospho S778); Dynamin 1 (phospho Ser778); p-Dynamin 1 (S778); p-Dynamin 1 (Ser778); B dynamin; D100; DNM 1; DNM; DNM1; DYN1_HUMAN; Dynamin; Dynamin-1; Dynamin1.
交叉反應(yīng):Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Sheep
標(biāo)記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human Dynamin 1 around the phosphorylation site of Ser778
蛋白細(xì)胞定位: 細(xì)胞漿
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲(chǔ)存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50%
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。
相關(guān)產(chǎn)品:
CD329抗體
果蠅CG6856-PA抗體
巨噬細(xì)胞炎性蛋白抗體
細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體
4號(hào)染色體開放閱讀框28抗體
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標(biāo)記法:
直接標(biāo)記法 | 間接標(biāo)記法 |
抗體的準(zhǔn)備:取提純的Ig溶液測(cè)定蛋白質(zhì)含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計(jì)算,準(zhǔn)確稱取后加入抗體溶液中; 標(biāo)記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫(kù)繼續(xù)攪拌12~18h; 透析:結(jié)合完畢后,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜; 過柱:取透析過夜的標(biāo)記物,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游 | 抗體的準(zhǔn)備:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標(biāo)記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶?jī)?nèi)放入冰槽中; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分?jǐn)噭颍?span> 透析或過柱層析。 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽(yáng)性。
SUZ12: 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml
Estrogen Related Receptor gamma: 雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml
β10抗體 Anti-Tβ10 0.1ml
Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標(biāo)記原肌球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚0酸鹽0酸酶樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–α(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸抑制劑(vaspin)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,vaspin ELISA Kit
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 96T/48T
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)酶聯(lián)免疫試劑盒
DH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升
MouseOsteoprotegerinLigand,OPGL酶聯(lián)免疫試劑盒小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)酶聯(lián)免疫試劑盒
phospho-Dynamin 1 (Ser778)抗體微黃線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Nematodirus helvetianusPCR 50T
武氏盾螨PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Acarapis woodiPCR 50T
小孢子酒曲菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Rhizopus microspousPCR 50T
星狀諾卡菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Nocardia asteroidesPCR 50T
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。