細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)公司*的產(chǎn)品：GAPDH(3E12) 3-甘油脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)(R)-(-)-3--2-丁 98%, ee 97%
GAPDH 兔抗3-甘油脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)(S)-(+)-3--2-丁 98+%, ee 99%
Beta-Actin β-肌動(dòng)蛋白抗體（內(nèi)參抗體）2-氨苯 99%
14-3-3 14-3-3蛋白抗體DL

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)

英文名稱：Hoechst Staining Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100次

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)英文名稱：TGF-β2 ELISA Kit載脂蛋白E4抗體包裝25g

轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)英文名稱：TGFβ2 ELISA Kit自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體包裝10mg

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)英文名稱：TGF-β1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝50mg

轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)英文名稱：TGFβ1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝25g

轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)英文名稱：TGF-α ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)英文名稱：TGFα ELISA Kit磷化失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g

主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)英文名稱：MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝5g

主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)英文名稱：MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g

主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名稱：MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)英文名稱：TSGF ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝1g

腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)英文名稱：TGSF ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g

腫瘤壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)英文名稱：TWEAK ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g

腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(TRAIL-R4)英文名稱：TRAIL-R4 ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝25g

腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)英文名稱：TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗體包裝100g

腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)英文名稱：TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗體包裝25g

磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)立枯絲核 五-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖1,25二羥基D檢測試劑盒

盤長孢狀盤孢 卡比多巴1,25-二羥基D3檢測試劑盒

紅鬼筆 紫蘇1,3-二磷酸甘油酸檢測試劑盒

伯克霍爾德 鹽酸芬他林1,4,5-三磷酸肌檢測試劑盒

環(huán)圈鏈霉 乙酰甲喹1,5-脫水葡萄糖;1,5-脫水山梨檢測試劑盒

青霉 β-煙酰單核苷酸11去氫血栓烷B2檢測試劑盒

阿舒假囊酵母 氟化鍶11脫氫血栓素B2檢測試劑盒

曲霉屬 香葉木素1-3-β-D葡聚糖檢測試劑盒

解脂假絲酵母 DL-薄荷14-3-3蛋白eta檢測試劑盒

白布勒擔(dān)孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧酶檢測試劑盒

白靈側(cè)耳 高良姜素17β-雌二檢測試劑盒

靈芝屬 聚氧烯甘油GP17-羥皮質(zhì)類固檢測試劑盒

黑木耳 單雙甘油脂肪酸脂17羥孕酮檢測試劑盒

美澳型核果褐腐病 7-異氧基異黃酮17-酮皮質(zhì)類固檢測試劑盒

玉米大斑病 槐定堿1α羥化酶檢測試劑盒 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)