以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PI溶液(1mg/ml) | Propidium Iodide Solution | 1ml | 1~3天 |
商品介紹:
本產(chǎn)品為PI水溶液,濃度為1mg/ml。使用時根據(jù)實驗不同直接將本產(chǎn)品用相應(yīng)溶液稀釋到工作濃度。 碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種可對DNA 染色的細胞核染色試劑。它是一種溴化乙啶的類似物,在嵌入雙鏈DNA 后釋放紅色熒光。PI 不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和死細胞的破損細胞膜能夠穿透,并使細胞核紅染。PI 經(jīng)常被用來與Calcein-AM 或者FDA 等熒光探針一起使用,能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA 復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm 和615 nm。常用于流式細胞儀分析和顯微鏡觀察,檢測細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)。 別名:碘化丙啶溶液 CAS號:25535-16-4 分子式:C27H34I2N4 分子量:668.39 儲存條件:-20℃,有效期至少2年 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
AV-951英文名稱: Adenosine磷化鈣調(diào)磷B亞基B1抗體包裝5g
BGJ398(NVP-BGJ398)英文名稱: Adiphenine HCl羊毛甾14α-去基化蛋白抗體包裝5g
Carmustine(進分)英文名稱: Adiphenine HCl補體C5抗體包裝1g
CEP-18770英文名稱: Alarelin Acetate5號染色體開放閱讀框24抗體包裝250mg
HSP990英文名稱: Alendronate Sodium5號染色體開放閱讀框42抗體包裝250mg
MK4827 (Niraparib)英文名稱: Alendronate Sodium5號染色體開放閱讀框49抗體包裝250mg
O-6-芐基鳥嘌呤英文名稱: Allopurinol5號染色體開放閱讀框35抗體包裝1g
Ruxolitinib(INCB018424) pho...英文名稱: Allopurinol中心體蛋白192抗體包裝25g
SB431542,SB-431542英文名稱: Allylestrenol中心體蛋白27抗體包裝5g
TAE684英文名稱: Allylestrenol中心體蛋白290抗體包裝100g
Tamoxifen Citrate英文名稱: Alprostadil,PGE1,中心體蛋白63抗體包裝25g
Tariquidar,XR-9576英文名稱: Altrenogest中心體蛋白70/p10結(jié)合蛋白抗體包裝5g
阿法替尼英文名稱: Altrenogest中心體蛋白72抗體包裝1ml
阿法替尼雙馬來鹽英文名稱: Amantadine HCl中心體蛋白95抗體包裝25g
阿西替尼英文名稱: Amantadine HCl中心體蛋白89抗體包裝1g
: AS2.606資源名稱: 橢圓釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三合物胰高血糖樣肽1試劑盒異綠原C;Isochlorogenic
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,三合物胰高血糖試劑盒異綠原B;Isochlorogenic
拉曼小毛霉原變種Micromucor│ramarnianus 質(zhì)量規(guī)格:效價≥750IU/MG,BP,BR胰多肽試劑盒異綠原A;Isochlorogenic
PI溶液(1mg/ml)楊奇青霉 1-苯基正癸烷血管生成樣蛋白8Elisa
沙諾氏芽孢桿 3-溴甲酯谷氨酸脫羧65抗體Elisa
幼角鐮孢 4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮谷氨酸脫羧65IgG抗體Elisa
黑色附球霉 3,5-二溴-4-硝基吡唑新型隱球抗原Elisa
大腸埃希 薄荷酮, mixture of isomers血管內(nèi)皮生長因子DElisa
雅致枝霉 2-溴-3-氟三氟甲苯沙眼衣原體IgA抗體Elisa
谷氨酸棒桿 (S)-3-氨基四對甲苯磺酸鹽枸櫞酸Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 2-氨基-2,4-二氯煙酸甲酯磷酸二酯9AElisa
大孔 (R)-(+)-alpha-氨基-gamma-丁內(nèi)酯鹽酸鹽耐膽鹽Elisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 普羅帕脒整合αMβ2Elisa
黃色糖多孢 N-芐基-雙鄰氯乙基氨基鹽酸鹽整合αVβ5Elisa
居真細屬 泛昔洛韋微管相關(guān)蛋白輕鏈3IIElisa
少根根霉 3,5-二氟-4-甲氧基苯甲甲型肝炎抗原Elisa
纖維單胞 帕拉米韋三水合物腫瘤蛋白p53Elisa
金黃桿 阿替美唑鹽酸鹽氧化低密度脂蛋白IgG抗體Elisa