ANNEXIN V- FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：GPNMB/Osteoactivin GPNMB抗體二苯磺鈉 IND
glypican 1 脂酰蛋白聚糖-1抗體二苯磺鈉 ≥97.0% (HPLC)
glypican 3/GPC3 脂酰蛋白聚糖-3抗體2,6-二-O--β-環(huán)糊精 98%
Glypican 4 脂酰蛋白聚糖-4抗體1,2-環(huán)己二四(DCTA) AR,9

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
2,3-二磷甘油(2,3-BPG)英文名稱：2,3-BPG ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框84抗體包裝1g

1號(hào)染色體開放閱讀框85(C1orf85)英文名稱：C1orf85 ELISA KitE3泛蛋白連接CHIP蛋白抗體包裝5g

17-羥孕(17-OHP)英文名稱：17-OHP ELISA Kit肉堿O-乙酰基轉(zhuǎn)移包裝100g

17-β-羥基類固脫氫10(HSD17β10)英文名稱：HSD17β10 ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框45抗體包裝25g

155kDa核孔蛋白(NUP155)英文名稱：NUP155 ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝500g

12-羥基二十烷四烯(12-HETE)英文名稱：12-HETE ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框136抗體包裝1g

10kDa熱休克蛋白1(HSP10)英文名稱：HSP10 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框138抗體包裝25g

10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)英文名稱：IP10 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框145抗體包裝5g

107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)英文名稱：INPP4A ELISA KitCD39抗體包裝100ml

1,25-二羥基維生D3(DHVD3)英文名稱：DHVD3 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框106抗體包裝500ml

2-氧基雌二英文名稱： Acarbose 6號(hào)染色體開放閱讀框115抗體包裝100ml

2-巰基乙烷磺鈉(美司那)英文名稱： Acarbose 6號(hào)染色體開放閱讀框123抗體包裝500ml

5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷英文名稱： Acyclovir6號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝1g

6-硫鳥嘌呤英文名稱： Acyclovir6號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝5g

Alectinib；CH5424802英文名稱： Adenosine6號(hào)染色體開放閱讀框132抗體包裝25g

致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰高血糖樣肽2受體試劑盒異麥角甾苷;Isoacteoside

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereu 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR胰高血糖樣肽2試劑盒鳶尾黃;Tectorigenin

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品胰高血糖樣肽1受體試劑盒蕓香柚皮苷;Narirutin
ANNEXIN V- FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒凍干補(bǔ)體 R-2,6-二氨基-4,5,6,7-四氫苯并噻唑神經(jīng)顆粒Elisa

美澳型核果褐腐病 環(huán)十五內(nèi)酯傳染性胸膜肺炎Elisa

Paenibacillus 4-乙炔基可替寧Elisa

大腸埃希 1,4,7-基二乙烯三激肽釋放原Elisa

大腸埃希 銨二(氧酸根)羰基鈦酸(IV)水合物, Puratronic硫代酸反應(yīng)物Elisa

大腸埃希 溴化鋇, 無(wú)水堿性磷酸Elisa

黃硬皮馬勃 5-氨基-吡唑-3-甲酸乙酯蔗糖異麥芽糖Elisa

柱孢綠僵 3-(2,5-二甲氧基苯基)酸蔗糖異麥芽糖Elisa

美麗胡枝子根瘤 3-氨基-4-三氟甲苯白介39Elisa

棉阿舒囊霉 4-氯-3-甲酰基苯顆粒AElisa

綠色木霉 5-基-1H--2-羧酸乙酯穿孔;成孔蛋白Elisa

大腸埃希 5-乙氧基殼三糖Elisa

釀酒酵母 尿刊酸登革熱病Elisa

弓形蟲(GTS－2株) 4-溴-1,1,2-三氟-1-乙型肝炎病Elisa

灰樹花-4 MDA 19絲氨酸蛋白抑制劑B1Elisa