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細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)

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更新時(shí)間:2022-04-21 10:46:00瀏覽次數(shù):225

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次
貨號(hào) GOY-01X9555 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Luminescent Cell Viability Assay Kit
細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)公司正在出售的產(chǎn)品:phospho-Ataxin-1(Ser775) 化失調(diào)癥蛋白1抗體葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)
AVEN 凋亡、半胱蛋白酶激活抑制劑抗體葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Kir6.2 ATP敏感性通道亞kir6.2抗體胰高血糖素氫化物(人) ≥97.0% (HPLC)
AVPR2 精氨加壓素受體2抗體羥萘酚藍(lán) IN

詳細(xì)介紹

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)

Luminescent Cell Viability Assay Kit

100次|500次

1~3天

商品介紹:

本試劑盒是一種通過(guò)化學(xué)發(fā)光法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP含量從而來(lái)定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與Promega公司的同類產(chǎn)品基本相同,對(duì)于相同的細(xì)胞樣品本試劑盒的發(fā)光效果更強(qiáng)一些。

本試劑盒比常見(jiàn)的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細(xì)胞活力測(cè)定方法更加簡(jiǎn)單快捷。只需把試劑盒提供的檢測(cè)試劑與培養(yǎng)細(xì)胞等體積混合,反應(yīng)10分鐘后即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。無(wú)需洗滌細(xì)胞,也無(wú)需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定,在反應(yīng)開(kāi)始后的10分鐘內(nèi)無(wú)顯著變化,30分鐘內(nèi)的下降不超過(guò)10%。

本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測(cè),也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測(cè)。

本試劑盒線性范圍廣,檢測(cè)靈敏度高。用96孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí),本試劑盒在0-50,000個(gè)細(xì)胞/孔的細(xì)胞密度范圍內(nèi)有良好的檢測(cè)效果,并且在僅有幾百個(gè)細(xì)胞時(shí)仍有良好的線性關(guān)系。當(dāng)細(xì)胞數(shù)量?jī)H為50個(gè)/孔時(shí),發(fā)光強(qiáng)度可達(dá)空白孔的5倍左右。

ATP,作為重要的能量分子,在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP是細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)重要指標(biāo),也是具有代謝活性細(xì)胞的重要標(biāo)志性分子,并和活細(xì)胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此,ATP含量能很好地反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目,即本試劑盒可以通過(guò)測(cè)定ATP含量來(lái)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或檢測(cè)細(xì)胞活力。

本試劑盒通過(guò)ATP檢測(cè)細(xì)胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng),ATP可以通過(guò)測(cè)定化學(xué)發(fā)光來(lái)進(jìn)行定量。由于ATP含量能很好地反映活細(xì)胞的數(shù)目,而ATP含量和發(fā)光強(qiáng)度成正比,這樣就可以簡(jiǎn)單地通過(guò)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度來(lái)計(jì)算出細(xì)胞活力或細(xì)胞數(shù)目。

細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)檢測(cè)ATP的原理圖

對(duì)于96孔板,我們推薦使用100μl細(xì)胞培養(yǎng)液和100μl的檢測(cè)試劑,總體積為200μl,此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行100次檢測(cè)。對(duì)于384孔板,我們推薦使用25μl細(xì)胞培養(yǎng)液和25μl的檢測(cè)試劑,總體積為50μl,此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行400次檢測(cè)。也可以用其它體積的試劑進(jìn)行檢測(cè),但細(xì)胞培養(yǎng)液和檢測(cè)試劑體積的比例必須為1:1。

儲(chǔ)存條件:室溫,有效期2年。

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)英文名稱:sRANKL ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ3抗體包裝1g

可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)英文名稱:sTLR9/sCD289 ELISA Kit腺苷單磷活化蛋白激β2抗體包裝25g

可溶性Toll樣受體4(sTLR4)英文名稱:sTLR4 ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝5g

可溶性Toll樣受體2(sTLR2)英文名稱:sTLR2 ELISA Kit周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝5g

可溶性P選擇(sP-selectin)英文名稱:sP-selectin ELISA Kit磷化蛋白激B2抗體包裝25g

可溶性Endoglin(ENG/sCD105)英文名稱:ENG/sCD105 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝5g

可溶性CD86(B7-2/sCD86)英文名稱:B7-2/sCD86 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝25g

可溶性CD40配體(sCD40L)英文名稱:sCD40L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g

可溶性CD30配體(sCD30L)英文名稱:sCD30L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝100ml

可溶性CD30(sCD30)英文名稱:sCD30 ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝500ml

顆粒B(Gzms-B)英文名稱:Gzms-B ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝5MG

顆粒A(Gzms-A)英文名稱:Gzms-A ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝1g

抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)英文名稱:EMAb ELISA Kit發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體包裝100g

抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)英文名稱:pANCA ELISA Kit磷化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體包裝25g

抗中性粒/中心體抗體(ACA)英文名稱:ACA ELISA Kit蛋白激B3包裝25ml

磷化通道蛋白2抗體C反應(yīng)蛋白(CRP)Ruxolitinib phosphate (INCB018424 phosphate) 是一種有效的 JAK1/2 抑制劑, IC50 分別為3.3 nM/2
細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)季也蒙邁耶氏酵母 3,5-二叔丁基苯酸膽堿酯酶檢測(cè)試劑盒

平田頭菇 4-BOC-哌-1-硫酰膽酸檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母 (4-溴苯基)脲膽汁酸檢測(cè)試劑盒

短密木霉 4-氨基氮雜環(huán)庚烷-1-羧酸叔丁酯彈性蛋白檢測(cè)試劑盒

粘質(zhì)沙雷氏 N-Cbz-L-苯氨酸彈性蛋白酶檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 4-氯-2,6-二氟蛋白(肽酰脯氨酰順;反異構(gòu)酶)檢測(cè)試劑盒

白僵 2-溴-3-羥基苯甲蛋白C檢測(cè)試劑盒

黑曲霉 四氯鄰苯二蛋白S檢測(cè)試劑盒

糞腸球(糞鏈球) 1H-1,2,4-三氮唑-1-甲脒單鹽酸鹽蛋白Z檢測(cè)試劑盒

藤黃微球 3-甲氧基-2-甲苯蛋白Z依賴的蛋白酶抑制劑檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 硫酸鈦蛋白多糖檢測(cè)試劑盒

淺黃鏈霉 3-氯異喹啉蛋白激酶A檢測(cè)試劑盒

牛鏈球 蘭氏D群 2,3-二氟-4-溴蛋白激酶C檢測(cè)試劑盒

大腸埃希 6-溴-3H-異苯并呋喃-1-酮蛋白激酶C-β1檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母 2-甲基-3-噻吩甲酸乙酯蛋白酪氨酸激酶檢測(cè)試劑盒

 


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