公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):nAChR和mAchR受體激動(dòng)劑
英文名稱(chēng):Carbamoylcholine chloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Carbamoylcholine氯化物用來(lái)研究nAChR和mAchR的介導(dǎo)的反應(yīng),包括平滑肌收縮,腸運(yùn)動(dòng),與神經(jīng)信號(hào)。Carbamoylcholine是乙酰膽堿類(lèi)似物,激活乙酰膽堿受體(AChR),Carbamoylcholine是nAChR和mAchR受體激動(dòng)劑,針對(duì)不同的受體,Ki值為10到10,000nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):51-83-2 別名:Carbachol;Carbamylcholine chloride 純度:98.0% 分子式:C?H??ClN?O? 分子量:182.65 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
慢生根瘤菌富含亮重復(fù)蛋白25抗體Human PAPSS2 ELISA Kit髓樣分化因子88(MyD88)ELISA Kit
四川散斑殼白介31受體a抗體Human PAR2 ELISA Kit髓樣分化蛋白2(MD-2)ELISA Kit
中國(guó)擬迷孔菌LRSAM1蛋白抗體Human PARD3 ELISA Kit髓性核分化抗原(MNDA)ELISA Kit
波蘭青霉LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human PARD6B ELISA Kit髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA Kit
叢毛單胞菌乳菌菌體表面蛋白抗體Human PARN ELISA Kit髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA Kit
日本根霉透明質(zhì)受體抗體Human PARD3 ELISA Kit髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)ELISA Kit
香菇白三烯A4水解抗體Human PARP10 (Poly [ADP-ribose] polymerase 10) ELISA Kit髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA Kit
耐熱芽孢芽孢桿菌肝臟X受體抗體Human PAMR1 ELISA Kit髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)ELISA Kit
異常畢赤酵母溶體蛋白跨膜β4抗體Human PAN2 ELISA Kit髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌富含亮重復(fù)神經(jīng)元5抗體Human BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) ELISA Kit髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA Kit
蠟狀芽孢桿菌親脂性蛋白B抗體Human PANK1 ELISA Kit髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA Kit
芽胞桿菌癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1抗體Human PANK2 ELISA Kit髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA Kit
噬幾丁質(zhì)菌屬賴(lài)酰氧化相關(guān)蛋白2抗體Human PAICS(Multifunctional protein ADE2) ELISA Kit髓過(guò)氧化物(MPO)ELISA Kit
湖泊黃桿菌基膜聚糖蛋白抗體Human PAGE2 ELISA Kit性鐵蛋白(AIF)ELISA Kit
側(cè)孢短小芽胞桿菌李斯特菌溶胞抗體Human PANK3 ELISA Kit性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)ELISA Kit
少根根霉亮羧基轉(zhuǎn)移1抗體Human PAIP1 ELISA Kit性磷(ACP)ELISA Kit
叢毛單胞菌Comamonas│testosteroni 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)人參皂苷Rb2
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)人參皂苷Rb1
海迪茨氏菌Dietzia│maris 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)擬人參皂苷F11
nAChR和mAchR受體激動(dòng)劑CD150/SLAM 信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體四鈀鈉 98%
CD151/MER2/PETA-3 CD151抗體六代鉑鈉六水合物 Pt 34.0%
CD155/PVR 脊髓灰質(zhì)炎病受體抗體金鈉 金含量,48%
CTLA-4/CD152 性T抗原-4抗體硫銠溶液 80g(Rh)/L水溶液
CTR1/Calcitonin receptor 降鈣受體抗體四氨合化鉑 水合物 98%
Cullin/C10orf46 CULLIN抗體四(三苯膦)鉑 Pt 15.2%
Cullin 4a Cullin 4a蛋白抗體戊酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
Connexin-26 間隙連接蛋白26抗體戊酯 AR,99.00%