商品介紹:
EMD638683R-Form是EMD638683的R型異構(gòu)體。EMD638683是一種選擇性的SGK1抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1184940-47-3 純度:99.73% 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:364.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
根瘤菌屬λ輕鏈抗體Human PDRG1 ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白2(HABP2)ELISA Kit
糞產(chǎn)堿菌糞亞種溶體相關(guān)膜蛋白2抗體Human PDS5A ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit
異常畢赤酵母肺腺瘤易感蛋白2抗體Human PDE6A ELISA Kit透明質(zhì)蛋白聚糖連結(jié)蛋白1(HAPLN1)ELISA Kit
大腸埃希氏菌磷化RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體Human PDCD5 ELISA Kit透明質(zhì)(HA)ELISA Kit
氣生馬賽菌腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDE6B ELISA Kit銅鋅-過(guò)氧化物岐化(SOD1)ELISA Kit
褐橙指孢囊菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PXDN(Peroxidasin homolog) ELISA Kit銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA Kit
鴨疫里氏桿菌磷化腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDCD6 ELISA Kit同源框A3(HOXA3)ELISA Kit
灰色鏈霉菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCD6IP ELISA Kit同型半胱(Hcy)ELISA Kit
膠凍樣芽胞桿菌白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCL ELISA Kit鐵調(diào)25(Hepc25)ELISA Kit
沙福芽孢桿菌亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子樣1抗體Human PDCD7 ELISA Kit鐵調(diào)(Hepc)ELISA Kit
海小單孢菌層粘連蛋白B2γ1抗體Human PDK3 ELISA Kit鐵-過(guò)氧化物岐化(Fe-SOD)ELISA Kit
阿氏芽孢桿菌磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM3 ELISA Kit鐵蛋白重鏈(FTH)ELISA Kit
木荷生德克斯酵母磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM5 ELISA Kit鐵蛋白(Ferritin)ELISA Kit
黃曲霉低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體Human PDLIM7 ELISA Kit鐵蛋白(FE)ELISA Kit
??曝愄厥暇字;D(zhuǎn)移2抗體Human PDP2 ELISA Kit調(diào)寧蛋白1(CNN1)ELISA Kit
孔雀石綠鏈霉菌LRRFIP2蛋白抗體Human PDRG1 ELISA Kit天青殺/肝結(jié)合蛋白(AZU/HBP)ELISA Kit
細(xì)黃鏈霉菌Streptomyces│microflavus 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(E)人參二
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(HPLC)(T)原人參三
橄欖色盾殼霉Coniothyrium│olivaceum Bonord. 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)原人參二
SGK1抑制劑(EMD638683 R-Form)Claudin-11 少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體硝釓,六水 99.999% metals basis
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體(C端)硝釤(III) 六水合物 99.9% metals basis
COMP/EPD1 軟骨寡聚質(zhì)蛋白抗體1,2,4,5-四 95%
COX1 前列腺氧化環(huán)化1抗體二硫化二苯并噻唑 98%
Cyclooxygenase 2/COX2 前列腺過(guò)氧化物合成2抗體2-巰苯并噻唑 98%
CDX2 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體二硫化四秋蘭姆 97%
COX IV-1 色c氧化IV亞型1抗體鉑銨 AR
Anti(c-phycocyanin C-藻藍(lán)/藻藍(lán)蛋白抗體亞鉑銨 鉑含量:52.0%