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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 10:05:34瀏覽次數(shù)：241
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20次|50次 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9533 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Annexin?V-FITC?Apoptosis?Detection?Kit |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
| Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 20次|50次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測20個(gè)細(xì)胞樣品。 試劑盒組份： Annexin V-FITC——————100μl Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml 碘化丙啶染色液——————220μl Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。 Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS)。磷脂酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。 用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。 本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。 本試劑盒的流式檢測效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測效果參考圖3。 1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測。從圖中可以看出，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽性并且PI染色陰性的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測誤差。實(shí)測數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。 2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細(xì)胞和雙陽性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)*在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。 儲(chǔ)存條件：4℃避光，有效期6個(gè)月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
血管生長(ANG)英文名稱：ANG ELISA KitAIMP2抗體包裝25g
血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)英文名稱：ANGPTL4 ELISA Kit乙酰膽堿抗體包裝5g
血管生成Ⅱ(ANGⅡ)英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit5-基乙酰合1抗體包裝10g
血管生成4(ANG-4)英文名稱：ANG-4 ELISA Kit防御α1/3抗體包裝50g
血管生成2(ANG-2)英文名稱：ANG-2 ELISA KitABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體包裝1g
血管生成1(ANG-1)英文名稱：ANG-1 ELISA Kit植物延長蛋白（擬南芥）包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)英文名稱：VCAM-1/CD106 ELISA KitA-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit紅腺苷脫3抗體包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit雄激結(jié)合蛋白抗體包裝10g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)英文名稱：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit肝再生增強(qiáng)因子抗體包裝50g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)英文名稱：VEGF-D ELISA KitAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)英文名稱：VEGF-C ELISA Kit胎蛋白單克抗體（包被）包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)英文名稱：VEGF-B ELISA Kit胎蛋白單克抗體(檢測)包裝1g
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)英文名稱：VEGF ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體白介4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒梨形卷枝霉 N-Boc-4-甲酸乙酯IκB激酶-α檢測試劑盒
假絲酵母屬 4-溴-2-氟三氟甲苯IκB激酶-β檢測試劑盒
鼠李糖小短桿 N,N,N-基乙二I型膠原蛋白檢測試劑盒
釀酒酵母 2-溴-4-氟甲苯I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物檢測試劑盒
分枝桿 3,5-二叔丁基-4-羥基I型原膠原N端前肽檢測試劑盒
蒙古口蘑 2,5-二氟-4-硝苯Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體檢測試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭 素C型 3,6-二氯噠KIT Ligand檢測試劑盒
鏈霉 馬來酸二乙酯Klotho蛋白檢測試劑盒
凍土毛霉 丁二酸二丁酯Klotho蛋白檢測試劑盒
樟疫霉 1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷二(四氟酸)鹽L1粘附分子檢測試劑盒
印度芽孢桿 對氯苯乙Laminin-5;Epiligrin檢測試劑盒
釀酒酵母 醋硝唑L-精氨酸檢測試劑盒
斑玉蕈 乙酸-4-酚酯L-乳酸檢測試劑盒
木蹄層孔 乙酰酮氧鈦(IV)L選擇素檢測試劑盒
枯草芽孢桿枯草亞種 4-氟-3-酸Mac-2結(jié)合蛋白檢測試劑盒
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