商品介紹:
PF-04971729(Ertugliflozin)是鈉離子依賴的葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1210344-57-2 別名:Ertugliflozin 純度:99.18% 分子式:C??H??ClO? 分子量:436.88 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SGLT2抑制劑(PF-04971729)
英文名稱:PF-04971729
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蠟狀芽孢桿菌促脂gamma抗體Human PIGB ELISA Kit凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)ELISA Kit
細(xì)鏈格孢核纖層蛋白B受體抗體Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA Kit
美澳型核果褐腐病菌長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS1抗體Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit烯化(NSE)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS6抗體Human PI4K2A ELISA Kit硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)ELISA Kit
弗吉尼亞鏈霉菌長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS5抗體Human PIGK ELISA Kit硒蛋白S(SELS)ELISA Kit
擬莖點(diǎn)霉屬長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS3抗體Human PIGM ELISA Kit硒蛋白P(SEPP1)ELISA Kit
橙色嗜熱子囊菌腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體Human PHKA1 ELISA Kit硒蛋白1(SEP1)ELISA Kit
鍺栓孔菌長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS4抗體Human PHIP ELISA Kit戊糖(Pentosidine)ELISA Kit
米曲霉RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體Human PHKA2 ELISA Kit舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)ELISA Kit
戊糖片球菌RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體Human PHKB ELISA Kit五聚3(PTX3)ELISA Kit
單增李斯特氏菌內(nèi)皮脂肪抗體Human AMACR(Alpha-methylacyl-CoA racemase) ELISA Kit無花果2(FCN2)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌淋巴抗原6G抗體Human PHKG1 ELISA Kit烏頭2(ACO-2)ELISA Kit
果生鏈核盤菌富含亮膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體Human PHKG2 ELISA Kit蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA Kit
美澳型核果褐腐病菌層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體Human PHLDA1 ELISA Kit蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)ELISA Kit
凝結(jié)芽胞桿菌唾液過氧化物LPO抗體Human PHLPP ELISA Kit胃粘液(GM)ELISA Kit
短小芽孢桿菌溶菌抗體Human PHLDA2 ELISA Kit胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)ELISA Kit
溝鞭藻赫夫勒氏菌Hoeflea│alexandrii 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)黃柏
蒼白鹽八疊球菌Halosarcina│pallida 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)靛藍(lán)
干酪乳桿菌Lactobacillus│casei 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N)牛蒡子苷
SGLT2抑制劑(PF-04971729)CLEC13D/CD206 巨噬甘露糖受體抗體3-新戊酰 98%
C-Met/Met/HGFR 肝生長(zhǎng)因子受體抗體代正烷 99%
Phospho-Met (Tyr1003) 化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體二酰 98%
Phospho-Met (Tyr1234/1235) 化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體三酯 97%
Phospho-Met (Tyr1349) 化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體酯 AR,99%
CMKLR1/CHEMR23 趨化樣因子受體1抗體異丁酰 98%
MTLC/C-myc 致癌因抗體酯 AR,99.0%
phospho C-Myc(Thr58/pSer62) 化致癌因C-Myc抗體酯 99%