CCCP細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑(50mM)公司正在出售的產(chǎn)品：FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1抗體氧鹽鹽 98%
FoxP1 叉頭蛋白P1抗體甜菜,無水 98%
FOXM1/HFH 11 叉頭蛋白M1抗體甜菜,一水 99%
FoxP3 叉頭蛋白P3抗體甜菜鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.5%
FOXO1 叉頭蛋白O1抗體酰酮鈹 97%
Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Th

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
白介15(IL15)英文名稱：IL15 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝100g

白介13受體α2(IL13Rα2)英文名稱：IL13Rα2 ELISA Kit兒茶酚O基移位抗體包裝25g

白介13(IL13)英文名稱：IL13 ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF9鏈多肽抗體包裝5g

白介12B(IL12B)英文名稱：IL12B ELISA Kit平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體包裝1g

白介12A(IL12A)英文名稱：IL12A ELISA Kit心肌病相關(guān)蛋白2包裝5g

白介11受體α(IL11Rα)英文名稱：IL11Rα ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框34抗體包裝100g

白介11(IL11)英文名稱：IL11 ELISA KitE1A激活基因激蛋白1抗體包裝25g

白介10(IL10)英文名稱：IL10 ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝5g

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)英文名稱：OCT4 ELISA Kit豬瘟病抗體包裝1g

酰tRNA合成復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)英文名稱：AIMP1 ELISA Kit3號(hào)染色體開放閱讀框54抗體包裝5g

基己糖苷Bβ(HEXβ)英文名稱：HEXβ ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框43抗體包裝5g

基己糖苷Aα(HEXα)英文名稱：HEXα ELISA Kit豬瘟病抗體包裝5g

基端前心鈉肽(NT-ProANP)英文名稱：NT-ProANP ELISA Kit中心體蛋白110抗體包裝1g

基端前腦鈉(NT-ProBNP)英文名稱：NT-ProBNP ELISA Kit纖維包裝5g

阿黑皮原(POMC)英文名稱：POMC ELISA Kit分裂周期蛋白14B抗體包裝10ml

假單胞菌Pseudomonas│testosteroni 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M試劑盒鹽葫蘆巴堿;Trigonelline

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L試劑盒鹽石蒜堿;Lycorine hydro

疣孢青霉Penicillium│verruculosum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分,sigma E1383 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L試劑盒雅姆皂苷元 ;yamogenin
CCCP細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑(50mM)銹赤蠟黃鏈霉 1-芐氧羰基-3-羥基氮雜環(huán)丁烷喋呤抗體Elisa

慢生根瘤 2,4-二溴吡啶-3-甲胃動(dòng)蛋白2抗體Elisa

釀酒酵母 3,4-雙(二氟甲氧基)苯甲Ⅱ型膠原α1Elisa

泡盛曲霉 6-溴-7-氟喹啉無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員1Elisa

馬沙門氏 1-Boc-2-T因子Elisa

白黃馬賽 1-二茂鐵基乙尿肌酐Elisa

黃曲霉 2-氯-4-甲氧基苯青霉Elisa

芽孢桿 N,N-雙(4-磺丁基)-3-鏈霉Elisa

布魯塞爾德克酵母 2-基-4-氟甲酯慶大霉Elisa

食有機(jī)物深海芽孢桿 6-氯-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮相關(guān)抗原11AElisa

卡門柏青霉 3-氟-4-溴溴芐肝吸蟲Elisa

Methylibium 基二茂鐵全反鈷II型Elisa

釀酒酵母 H-89 肝吸蟲IgM抗體Elisa

毛栓孔 1-甲基-1H-吡唑-4-肝吸蟲IgG抗體Elisa

類芽孢桿屬 1-N-芐氧羰基哌-2-甲酸甲酯抗磷脂A2受體IgG抗體Elisa