Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565傳代方法培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565傳代方法冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565傳代方法
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,20；D13S317：10,13；D16S539：11,14；D18S51：17,18；D19S433：12,12；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,17；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,9；TPOX：8,8；vWA：18,22；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565傳代方法操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

副品紅堿分子式：305.37分子量：C19H19N3O英文名稱：PararosanilineCAS號：467-62-9

3，5-二氟-2-吡啶英文名稱：3,5-two-2-fluoridecyanopyridinesCAS號：298709-29-2分子式：140.09分子量：C6H2F2N2

4-羥-4-溴聯(lián)英文名稱：4-hydroxy-4-CAS號：29558-77-8分子式：249.11分子量：C12H9BrO

磺胺二甲異嘧啶英文名稱：TwomethylISOCAS號：515-64-0分子式：278.33分子量：C12H14N4O2S

2,4,5-三溴甲英文名稱：2,4,5-threeCAS號：3278-88-4分子式：328.83分子量：C7H5Br3

6-叔丁-4-羥喹啉英文名稱：6-tertbutyl-4-hydroxygroupCAS號：444609-92-1分子式：201.2643分子量：C13H15NO

2-并咪唑英文名稱：2-aminobenzimidazoleCAS號：934-32-7分子式：133.15分子量：C7H7N3

亞硫酸氫鉀英文名稱：SodiumbisulfiteCAS號：7773/3/7分子式：120.17分子量：KHSO3

并四咪唑英文名稱：并四咪唑CAS號：885051-07-0分子式：252.34分子量：C15H12N2S

乙醇鋁英文名稱：EthanolaluminumCAS號：555-75-9分子式：162.16分子量：C6H15AlO3

11,12-二氫吲哚并[2,3-a]咔唑英文名稱：11,12-twohydrogenindolo[2,3-a]carbazoleCAS號：60511-85-5分子式：256.31分子量：C18H12N2

福來根分子式：264.19分子量：C10H8N4O5英文名稱：FulaigenCAS號：1672-88-4

2--4,6-二甲嘧啶英文名稱：2-two-4,6-CAS號：767-15-7分子式：123.16分子量：C6H9N3

2,3-二氟溴英文名稱：2,3-twofluorinebromineCAS號：38573-88-5分子式：192.99分子量：C6H3BrF2

3,5-二氯-4-羥吡啶英文名稱：3,5-two-4-hydroxypyridineCAS號：17228-70-5分子式：163.99分子量：C5H3Cl2NO HKC(人胚腎上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Caki-1, 人腎透明細(xì)胞膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞

宮頸英文名稱：caski

SMMC-7721(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Multi-tagged Protein Lysate(293T)/多標(biāo)簽蛋白裂解液(293T)100ug100uggersion

RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CHO-K1(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2

FLAG標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)

小鼠視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

BC-021(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

7.5% NaHCO3溶液規(guī)格：100ml

人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

McCown Woody Plant Vit Mix(Modified)BR100毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱：A2780/Taxol 

醋酸鉛培養(yǎng)基/乙酸鉛培養(yǎng)基/Lead Acetate Medium用于細(xì)菌的硫氫試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口

前列腺英文名稱：LNCaP

蠟樣芽孢桿菌計數(shù)顯色培養(yǎng)基250克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（未分）英文名稱：PC-12（未分）

肉浸液肉湯培養(yǎng)基/肉浸液肉湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565傳代方法V79(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂/胰酶大豆酵母浸膏瓊脂/TSA-YE/TSYEA用于單核細(xì)胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞

IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion