詳細(xì)介紹
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長特性注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人宮頸癌細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長特性
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細(xì)胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11;D12S391:22,22;D13S317:8,11;D16S539:12,12;D18S51:16,17;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14,14;D5S818:11,11;D6S1043:12,12;D7S820:13,13;D8S1179:14,15;FGA:24,25;Penta E:5,13;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長特性復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
結(jié)晶紫分子式:407.98分子量:C25H30N3Cl英文名稱:CrystalvioletCAS號:548-62-9
2,5-二甲氧-4-氯嘧啶英文名稱:2,5-twoa-4-CAS號:370103-25-6分子式:分子量:
1,4-雙(2,2,2-三氟乙氧)英文名稱:1,4-bis(2,2,2-three)CAS號:66300-61-6分子式:274.16分子量:C10H8F6O2
4,4'-二壬-2,2'-聯(lián)吡啶英文名稱:4,4'-twononyl-2,2'-bipyridineCAS號:142646-58-0分子式:408.67分子量:C28H44N2
1-(氯()甲)-2-甲英文名稱:1-(chloride(BenJi)methyl)-2-methylbenzeneCAS號:41870-52-4分子式:216.71分子量:C14H13Cl
4-羥喹唑啉英文名稱:4-hydroxygroupCAS號:491-36-1分子式:146.15分子量:C8H6N2O
1--3-甲-5-吡唑英文名稱:1-phenyl-3-methyl-5-CAS號:1131-18-6分子式:173分子量:C10H11N3
溴酸鉀英文名稱:PotassiumbromateCAS號:7758/1/2分子式:167分子量:KBrO3
4-碘1H-咪唑英文名稱:4碘1H-咪唑CAS號:71759-89-2分子式:193.97分子量:C3H3IN2
硫酸鋁英文名稱:AluminiumsulfateCAS號:7784-31-8分子式:666.43分子量:Al2(SO4)3·18H2O
7--2-并惡唑啉酮英文名稱:7--2--benzoxazoloneCAS號:81282-60-2分子式:150.14分子量:C7H6N2O2
對羥甲分子式:138.12分子量:C7H6O3英文名稱:ParahydroxybenzoicacidCAS號:99-96-7
2-羥吡啶英文名稱:2-hydroxypyridineCAS號:142-08-5分子式:95.1分子量:C5H5NO
2-氯-3,5-二硝三氟甲英文名稱:2--3,5-twonitrothreefCAS號:392-95-0分子式:270.55分子量:C7H2ClF3N2O4
2-溴-5-硝吡啶英文名稱:2--5-nitropyridineCAS號:24487-59-6分子式:202.99分子量:C5H5BrN2
2-溴聯(lián)英文名稱:2-bromideCAS號:2052/7/5分子式:233.1分子量:C12H9Br
3-溴-5-甲氧吡啶英文名稱:3-bromide-5-aCAS號:50720-12-2分子式:188.02分子量:C6H6BrNO MDA-MB-453(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HIC(人小腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株
食管鱗英文名稱:KYSE150
5%糖發(fā)酵管/5% Lactose Ferment Broth糖遲發(fā)酵菌種的鑒別250克國產(chǎn)/進口
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar Base炭疽桿菌的分離鑒別250克國產(chǎn)/進口
人回盲腸細(xì)胞英文名稱:HCT-8
改良SKIRROW氏瓊脂基礎(chǔ)/空腸彎曲菌瓊脂基礎(chǔ)/Skirrow Agar Base Modified用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠骨髓瘤細(xì)胞英文名稱:FO
酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Acid L-G medium Base堿性物質(zhì)處理的結(jié)核桿菌標(biāo)本250克國產(chǎn)/進口
人肝竇內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測250克國產(chǎn)/進口
俄勒岡地鼠英文名稱:Oregon vole
Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長特性木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
大鼠肝內(nèi)膽管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國產(chǎn)/進口
Super-Bradford蛋白定量試劑盒200ml國產(chǎn)
QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2