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人正常組織來(lái)源細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染流程
閱讀:174 發(fā)布時(shí)間:2018-4-18原理:
人正常組織來(lái)源細(xì)胞通過(guò) 脂質(zhì) 體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將靶基因?qū)爰?xì)胞,一般在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)左右,靶基因即可在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?8小時(shí)后即可進(jìn)行靶 基因表達(dá) 的檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用:
觀察目的基因及其表達(dá)蛋白在某種細(xì)胞中的功能(短時(shí)間即可進(jìn)行觀察,但效應(yīng)會(huì)很快丟失)。
一般流程:
1)細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前天接種細(xì)胞,各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長(zhǎng)率和細(xì)胞形狀而定。進(jìn)行轉(zhuǎn)染當(dāng)天細(xì)胞密度應(yīng)達(dá)到60%~80%覆蓋。
2)細(xì)胞轉(zhuǎn)染(脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等)
3)48小時(shí)以后鑒定目的基因的表達(dá)情況。
人正常組織來(lái)源細(xì)胞前期準(zhǔn)備:
構(gòu)建好的外源基因載體,或目的基因基本信息。
待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系(1×106個(gè)細(xì)胞,可傳代,倍增時(shí)間小于48小時(shí))以及 細(xì)胞培養(yǎng) 條件的說(shuō)明。
若需要檢測(cè)靶基因的表達(dá),請(qǐng)?zhí)峁┫鄳?yīng) 抗體。
Tartaric Acid 1g 左旋酒石酸標(biāo)準(zhǔn)品 87-69-4
Taurine 100mg ?;撬針?biāo)準(zhǔn)品 107-35-7
Tazobactam 200mg 他唑巴坦酸標(biāo)準(zhǔn)品 89786-04-9
misartan 150mg 替米沙坦標(biāo)準(zhǔn)品 144701-48-4
Temozolomide 200mg 替莫唑胺標(biāo)準(zhǔn)品 85622-93-1
Tenofovir 15mg 泰諾福韋標(biāo)準(zhǔn)品 206184-49-8
Tenofovir Disoproxil Fumarate 200mg 泰諾福韋酯富馬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 202138-50-9
Terazosin Hydrochloride 200mg 鹽酸特拉唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品 70024-40-7
Terbinafine Hydrochloride 200mg 鹽酸特比萘芬標(biāo)準(zhǔn)品 78628-80-5
Terbutaline Related Compound A 50mg 特布他林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
人正常組織來(lái)源細(xì)胞