公司動(dòng)態(tài)
測定轉(zhuǎn)化細(xì)胞周期方法的操作步驟
閱讀:158 發(fā)布時(shí)間:2018-4-13轉(zhuǎn)化細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。單個(gè)細(xì)胞的周期測定可采用縮時(shí)攝影的方法,但它不能代表細(xì)胞群體的周期,故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細(xì)胞周期的方法很多,有同位素標(biāo)記法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法等.我們看下操作步驟有哪些?
1、細(xì)胞生長至指數(shù)期時(shí),向培養(yǎng)液中加入BrdU,使zui終濃度為10μg/ml。
2、44小時(shí)加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時(shí)后常規(guī)消化細(xì)胞至離心管中,注意培養(yǎng)上清的漂浮細(xì)胞也要收集到離心管中。
4、常規(guī)染色體制片(見第三部分:染色體技術(shù))。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、轉(zhuǎn)化細(xì)胞鏡檢100個(gè)分裂相,計(jì)*、二、三、四細(xì)胞期分裂指數(shù)。
中藥對照藥材 車前草(車前) 1g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 決明子(小決明) 0.5g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 綿萆薢 2g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 黃根 5g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 藤合歡 1g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 川射干 1g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 合歡皮 1g 中藥對照藥材
中藥對照藥材 草果 2g 中藥對照藥材
標(biāo)準(zhǔn)品 氯霉素 500mg 標(biāo)準(zhǔn)品
轉(zhuǎn)化細(xì)胞