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影響人正常組織來源細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率因素主要有三個(gè)，細(xì)胞種類（狀態(tài)）、質(zhì)粒以及轉(zhuǎn)染試劑。為了得到一個(gè)好的轉(zhuǎn)染結(jié)果，我們要像下面這樣做。
轉(zhuǎn)染前
1、轉(zhuǎn)染前細(xì)胞的狀態(tài)和密度都非常影響轉(zhuǎn)染效率和后期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的密度為50%-80%較好，同時(shí)注意在轉(zhuǎn)染后收細(xì)胞時(shí)的密度不要過高。
比如轉(zhuǎn)染質(zhì)粒到細(xì)胞內(nèi)，48小時(shí)后做WB，那么此時(shí)細(xì)胞的密度不要長(zhǎng)滿. 因?yàn)榧?xì)胞長(zhǎng)的過高嚴(yán)重影響細(xì)胞的狀態(tài)（周期進(jìn)程阻滯，凋亡增加等）從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般為前一天下午鋪板，第二天上午進(jìn)行轉(zhuǎn)染，48小時(shí)后收細(xì)胞進(jìn)行功能檢測(cè)。
2、不同的質(zhì)粒和脂質(zhì)體*搭配比例不同，轉(zhuǎn)染前，應(yīng)該摸一個(gè)*配比?？梢园凑召|(zhì)粒：脂質(zhì)體=1：1， 1：1.5， 1：2， 1：2.5， 1：3， 1：3.5的梯度比例來檢測(cè)*轉(zhuǎn)染比例。
3、支原體污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率，且支原體污染不會(huì)像細(xì)菌污染那么明顯可見，轉(zhuǎn)染前可以用環(huán)丙沙星殺一殺支原體。
轉(zhuǎn)染時(shí)
轉(zhuǎn)染時(shí)
1、轉(zhuǎn)染時(shí)，要小心輕柔的將lipo2000加到培養(yǎng)基中并輕輕混勻（說明書上的用詞為：Mix gently），避免粗暴用力吹打，會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體失效。

2、轉(zhuǎn)染時(shí)各種培養(yǎng)皿添加的質(zhì)粒和脂質(zhì)體參考量對(duì)查看相對(duì)應(yīng)的表！
轉(zhuǎn)染后
1、現(xiàn)在大多數(shù)轉(zhuǎn)染試劑可以使用帶血清的培養(yǎng)基進(jìn)行轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染后6小時(shí)更換培養(yǎng)基，一是lipo2000具有一定毒性，二是培養(yǎng)基需要更換成有血清培養(yǎng)基。
2、轉(zhuǎn)染后效率的檢測(cè)：
（1）觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞熒光情況
（2）qPCR驗(yàn)證。
（3）WB檢測(cè)敲減或者過表達(dá)蛋白。
3、人正常組織來源細(xì)胞轉(zhuǎn)染后發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率不高，可以通過兩種方法：
（1）復(fù)轉(zhuǎn)染，即轉(zhuǎn)染后12-24小時(shí)再次進(jìn)行轉(zhuǎn)染，前提是該細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的耐受性較好，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞死亡數(shù)較少。
（2）通過藥篩來殺死未轉(zhuǎn)入成功的細(xì)胞。前提是該質(zhì)粒帶有抗生素抗性的基因。
Lumefantrine     苯芴醇標(biāo)準(zhǔn)品    82186-77-4     100mg
Bismuth Citrate    枸櫞酸鉍標(biāo)準(zhǔn)品    813-93-4    100mg
Clarithromycin    克拉霉素標(biāo)準(zhǔn)品    81103-11-9    100mg
Fluticasone Propionate     氟替卡松丙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    80474-14-2     100mg
Sertraline Hydrochloride     鹽酸舍曲林標(biāo)準(zhǔn)品    79559-97-0     100mg
Mebrofenin    甲溴菲寧標(biāo)準(zhǔn)品    78266-06-5     100mg
    碘海醇相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品    76820-34-3     100mg
Terfenadine Related Compound A    特非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    76815-60-6     100mg
Docusate Potassium    " 
1,2-二(2-乙基己基氧碳基)乙烷磺酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 7491-09-0    100mg
人正常組織來源細(xì)胞