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提高了轉(zhuǎn)化細(xì)胞合成脯氨酸的能力
閱讀:134 發(fā)布時間:2018-2-28轉(zhuǎn)化細(xì)胞對重組菌WB601和WB602的胞外脯氨酸積累情況分析可得,其胞外脯氨酸含量分別是原始菌的1.94倍和1.54倍,單位細(xì)胞胞外脯氨酸得率分別是原始菌的2.15倍和2.19倍,差別不大且較非脅迫時相比有所降低。與此同時,在不添加Gln時,glnA基因缺失的重組菌WB603胞外脯氨酸含量及單位細(xì)胞得率分別是原始菌的4.16倍和7.29倍,同樣低于非脅迫條件下。
相同條件下,相比于WB603,重組菌WB604的胞外脯氨酸含量及其單位細(xì)胞得率分別提高了32.61%和5.54%,較非脅迫時相比胞外脯氨酸提升幅度增加,而單位細(xì)胞胞外脯氨酸得率有所降低,這可能與在鹽離子脅迫時過表達(dá)proB基因的重組菌WB604菌體生長受到的影響較WB603小有關(guān)。
以上結(jié)果表明,在鹽離子脅迫條件下,glnA基因的缺失同樣能提高細(xì)胞合成脯氨酸的能力;而在此基礎(chǔ)之上過表達(dá)proB基因進一步提高了細(xì)胞合成脯氨酸的能力,但受鹽離子脅迫的干擾。此外,在添加Gln時,重組菌WB603和WB604的胞外脯氨酸含量分別比不添加時降低了29.47%和42.76%,且單位細(xì)胞胞外脯氨酸得率也明顯降低。轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能因為是在鹽離子脅迫條件下,菌株為了應(yīng)對脅迫環(huán)境,一方面通過自身的保護機制吸收外界脯氨酸維持體內(nèi)滲透壓,一方面可能利用胞外脯氨酸來盡可能合成生長需要的營養(yǎng)物質(zhì),而生長有缺陷的基因工程菌對此需求更大。值得注意的是,原始菌胞外脯氨酸含量較非脅迫時相比均有所提高,這可能是胞內(nèi)游離脯氨酸達(dá)到平衡后溢出所致。
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞