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丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬

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更新時(shí)間:2023-03-22 09:22:03瀏覽次數(shù):167

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2880 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Compone
物種 Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)    
丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬公司正在出售的產(chǎn)品:生長(zhǎng)激素抗體 英文名稱:Growth Hormone 0.1mlGDP甘露糖焦磷酸化酶抗體 英文名稱:GMPPA 0.2ml神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6b 英文名稱:GPM6B 0.2ml

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白物種:Mouse,小鼠PRKCA; PKC-A; AAG6; PKC-Alpha

Recombinant Dipeptidase 2 (DPEP2)產(chǎn)品名稱:二肽酶2(DPEP2)重組蛋白物種:Human,人酶與激酶

Recombinant Calpain 5 (CAPN5)產(chǎn)品名稱:鈣5(CAPN5)重組蛋白物種:Human,人HTRA3; nCL3; Calpain htra-3; New calpain 3

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬

Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

GOY-01D2880

 

 

英文名稱:Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Component X (PDHX)

E3BP; proX; PDX1; OPDX; DLDBP; E3-binding protein; Dihydrolipoamide dehydrogenase-binding protein of pyruvate dehydrogenase complex

型號(hào):GOY-01D2880

酶與激酶

物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:51.6kDa

實(shí)際分子量:54kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Pro54~Ala500 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基/BCP Glucase Peptone Water Medium用于壓力蒸汽滅菌效果評(píng)價(jià)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

(S)-鹽d5  質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Fluoxetine-d5 Hydrochloride

 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢耐藥細(xì)胞株

琥珀酰 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluoxetine Succinamic Acid

 One Step Western Kit HRP (Mouse)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(鼠)50次2次、10次、50次gersion

(S)-鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Fluoxetine Hydrochloride

 NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

d5 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluoxetine-d5 Hydrochloride

 EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

(R)-鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (R)-Fluoxetine Hydrochloride

 MCF7/腺細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)

氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluvoxamine Acid

 Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

(順式)氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (Z) Fluvoxamine

 HEp-2(人喉表樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

N-(2-丁二酰)氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 N-(2-Succinyl) Fluvoxamine

丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pcDNA3.1 pcDNA3.1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 Nitrate peptone water medium 250g

5g 溴甲紫 Bromocresol Purple 室溫保存

人組胺(HIS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pPICZα D pPICZα D 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),20X  Tris Buffered Saline(TBS),20X  常溫保存

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)(2015藥典) Tryptose Soya Agar 250g

30次 一站式SDS-PAGE電泳套裝 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存,上樣緩沖液需要-20℃保存,其余常溫保存

人凋亡蛋白激活因子1(APAF1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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