詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
肌肽酶2(CNDP2)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2588 |
英文名稱:Recombinant Carnosine Dipeptidase 2 (CNDP2)
PEPA; CN2; CPGL; Peptidase A; Cytosolic Nonspecific Dipeptidase; Metallopeptidase M20 Family; Glutamate carboxypeptidase-like protein 1
型號:GOY-01D2588
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞質(zhì)
預測分子量:24.9kDa
實際分子量:25kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Glu285~Asn475 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:9.1
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
基質(zhì)金屬11(MMP11)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)SL3; ST3; STMY3; Stromelysin 3物種:Mouse,小鼠
脲酰丙酸酶β(UPB1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Beta-ureidopropionase (UPB1)UP-B1; BUP1; Beta-alanine synthase; Ureidopropionase Beta; N-carbamoyl-beta-alanine amidohydrolase物種:Mouse,小鼠
蛋白二硫鍵異構酶(PDI)活性蛋白英文名稱:Active Protein Disulfide Isomerase (PDI)P4HB; ERBA2L; PDIA1; PO4DB; PROHB, DSI, GIT, PDI, PO4HB, P4Hbeta; Prolyl 4-Hydroxylase Subunit Beta; Procollagen-Proline 2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase Beta Polypeptide物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
香菇 Lentinula edodes凍膠假絲酵母 Candida gelida
硫堇(>90%,BS) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BS Thionin
BEL-7404(人肝細胞)普通變形桿菌 Proteus vulgaris
硫代水楊(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Thiosalicylic acid
根瘤菌酒假絲酵母 Candida kefyr
吐啉(>90%,Ind Grade) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,Ind Grade Thorin
谷氨棒桿菌 Corynebacterium glutamicumE.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞)
硫鏈絲菌素 質(zhì)量規(guī)格:>90%,進分 Thiostrepton from Streptomyces azureus
SP Rabbit HRP Kit/兔Streptavidin-HRP試劑盒豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
胸腺(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Thymine
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMKN-28(人胃高轉(zhuǎn)移細胞)
特泯菌 質(zhì)量規(guī)格:BC Timentin
香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
草亞錫(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Tin (II) oxalate
人胎盤絨毛膜細胞培養(yǎng)基杜鵑盤多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
二氧化錫(> 99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BR Tin (IV) oxide
肌肽酶2(CNDP2)重組蛋白小鼠2 ug pET-24b(+) pET-24b(+) 低溫運輸,-20℃保存
1 管 Stbl4大腸桿菌 Stbl4 E.coli Strain -80℃保存
100µL 小鼠抗V5標簽單抗 Anti V5-Tag Mouse MAb -20℃保存
1瓶 MEG-01細胞株 MEG-01 低溫運輸和保存
大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)免疫試劑盒
人亮氨基肽3(LAP3)免疫試劑盒進口、組裝
TPY液體培養(yǎng)基 TPY Fliud Medium 250g
人3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)免疫試劑盒進口、分裝
2 ug pENTR3C pENTR3C 低溫運輸,-20℃保存
O/F培養(yǎng)基(HLGB) O/F Medium 250g
mTSB肉湯 mTSB Broth With Novobiocin 250g