詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
葡萄糖磷酸變位酶(PGM2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2519 |
英文名稱:Recombinant Phosphoglucomutase 2 (PGM2)
Glucose phosphomutase 2; Phosphodeoxyribomutase; Phosphopentomutase
型號(hào):GOY-01D2519
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::Cytoplasm.
預(yù)測(cè)分子量:28.6kDa
實(shí)際分子量:28.6kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ala2~Asn227 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):6.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶7相互作用蛋白1(MAP3K7IP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 7 Interacting Protein 1 (MAP3K7IP1)TAB1; TGF-Beta Activated Kinase 1/MAP3K7 Binding Protein 1; TAK1-Binding Protein 1; TGF-beta-activated kinase 1-binding protein 1物種:Human,人
非ATP酶體26S亞基4(PSMD4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 4 (PSMD4)ASF; AF-1; AF; MCB1; Rpn10; S5A; pUB-R5; Antisecretory factor 1; Multiubiquitin chain-binding protein; 26S proteasome regulatory subunit RPN10物種:Human,人
基質(zhì)金屬8(MMP8)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)CLG2; HNC; PMNL-CL; Collagenase 2; Neutrophil Collagenase; PMNL collagenase物種:Guinea pig ,豚鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusJ774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)
1,3-二(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 1,3- Propylene Glycol
人睪支持細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
二甘(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 Diethylene Glycol
動(dòng)膠菌 Zoogloea sp.彈性(含10mL酶解緩沖液)
鹽阿米洛利雜質(zhì)(4-氨基-6--1,3-基二硫酰)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae鏈霉菌 Streptomyces sp.
噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 Chlorothiazide
HAN(人羊膜細(xì)胞)熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
鹽地芬尼多雜質(zhì)(化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 Alkene
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae美味牛肝菌 Boletus edulis
N-甲基(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 N-Methylparoxetine
鉤狀木霉小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基
七氟(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供GC法檢查用 Sevoflurane
人食管細(xì)胞人膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
二芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:檢查 Diaveridine
葡萄糖磷酸變位酶(PGM2)重組蛋白人麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) Maconkey Agar Medium 250g
25 T 一氧化氮檢測(cè)試劑盒(硝酸還原法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
1g 庚烷磺酸鈉 1-Heptanesulfonic Acid Sodium Salt 密封干燥保存
人細(xì)小病毒B19(B19V)抗體(IgM)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2 常溫保存
小鼠雌二醇(E2)免疫試劑盒
牛甘油酸酯激2(PGK2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug pAAV-MCS pAAV-MCS 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養(yǎng)基 Deoxycholate Citrate Agar Medium 250g
小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)