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鈣蛋白酶5(CAPN5)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-20 11:37:30瀏覽次數(shù):132

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2512 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Calpain 5 (CAPN5)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
鈣蛋白酶5(CAPN5)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:大腸埃希菌菌體蛋白抗體 英文名稱:E.coli 0.1ml雌激素轉(zhuǎn)移酶抗體 英文名稱:Estrogen Sulfotransferase 0.1ml登革熱病毒包膜糖蛋白E抗體 英文名稱:Dengue virus envelope glycoprotein E 0.2ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

鈣蛋白酶5(CAPN5)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2512

 

 

英文名稱:Recombinant Calpain 5 (CAPN5)

HTRA3; nCL3; Calpain htra-3; New calpain 3

型號(hào):GOY-01D2512

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:69.4kDa

實(shí)際分子量:70kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Phe2~Asn344 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):5.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

鐵氧還蛋白還原酶(FDXR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ferredoxin Reductase (FDXR)ADXR; AR; Adrenodoxin Oxidoreductase,Mitochondrial; Adrenodoxin reductase; Ferredoxin--NADP(+) reductase物種:Mouse,小鼠

?;姿崦?/span>2(ACYP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Acylphosphatase 2 (ACYP2)ACYM; ACYP; Acylphosphatase, muscle type isozyme; Acylphosphatase 2, Muscle; Acylphosphate phosphohydrolase 2物種:Mouse,小鼠

蛋白激酶Bα(PKBa)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase B Alpha (PKBa)AKT1; AKT; PKB-A; Proto-oncogene c-Akt; RAC-Alpha Serine/Threonine-Protein Kinase; V-akt Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1物種:Human,人

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae暫無 Gluconobacter cerinus

鹽乙哌立松(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Eperisone hydrochloride

 大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 Metarhizium majarosporae= anisopliae var. majus黑木耳 Auricularia auricula

孕三(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Gestrinone

 A549, 人肺細(xì)胞系小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

地平 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Cilnidipine

 人肝細(xì)胞PBS(10X)

地平(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 Cilnidipine

 鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum

托品(鹽托司瓊雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 Tropine

 蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

輔酶Q9 質(zhì)量規(guī)格:>99% CoenzymeQ9

 SF767(人腦瘤細(xì)胞)NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)

輔酶Q9(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 CoenzymeQ9

 溝腸桿菌 Enterobacter cloacae宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Leucoson

鈣蛋白酶5(CAPN5)重組蛋白人雞糖皮質(zhì)激素(GC)免疫試劑盒

1g  Lysozyme, Egg White -20℃保存

山羊M型肌酸激(CKM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2 ug pZL507 pZL507 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

豬低分子肝素(LMWH)免疫試劑盒

100次 即用型EMSA試劑盒 EMSA Kit -20℃保存

250mL Veronal Buffered Saline VBS  Veronal Buffered Saline VBS  常溫保存

5mL MgCl2溶液,25mM,PCR級(jí) MgCl2,PCR Grade -20℃保存

1瓶 UM細(xì)胞株 UM 低溫運(yùn)輸和保存

人白介素25(IL-25)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

500 U 限制性內(nèi)切DpnI Restriction Endonuclease -20℃保存

 


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