蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)

dNT-2; dNT2; mdN; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, mitochondrial

型號：GOY-01D2479

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：23.7kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Val30~Arg209 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)GL-B; b-GAL; bGAL; ELNR1; EBP; GLB1; Lactase; Elastin Receptor 1,67kDa; Elastin Receptor 1(67kD); Acid Beta-Galactosidase物種：Mouse，小鼠

支鏈轉氨酶1(BCAT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Branched Chain Aminotransferase 1, Cytosolic (BCAT1)BCT1; ECA39; Branched-chain-amino-acid aminotransferase, cytosolic物種：Rat，大鼠

組蛋白脫乙?；?/span>9(HDAC9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Histone Deacetylase 9 (HDAC9)HD7; HDAC; HDAC7; HDAC7B; HDAC9B; HDAC9FL; HDRP; MITR; Histone deacetylase-related protein; MEF2-interacting transcription repressor MITR; Histone deacetylase 7B物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

球形芽胞桿菌 Bacillus sphaericus香菇 Lentinula edodes

車葉草苷（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Asperuloside

 F9(小鼠畸胎瘤細胞)cECL Western Blot Kit/低背景化學發(fā)光檢測試劑盒

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己（標準品） 質量規(guī)格：含量測定 Pentoxifylline

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山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷 質量規(guī)格：HPLC≥85%,標準品 Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside

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波必利（標準品） 質量規(guī)格：UV法含量測定 Clebopride

 宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

醉魚草皂苷IVb（標準品） 質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 Buddlejasaponin Ivb

 松塔牛肝菌 Strobilomyces strobilaceus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

（標準品） 質量規(guī)格：含量測定 Erdosteine

 小鼠白血病細胞始旋鏈霉菌 Streptomyces pristinae

吡美莫司;匹美莫司 質量規(guī)格：>95%,BR Pimecrolimus

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白大鼠2 ug pOTB7 TOMM34 pOTB7 TOMM34 低溫運輸，-20℃保存

500mL Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   常溫保存

人登革熱(DF)抗體(IgG)免疫試劑盒

大鼠β-轉導重復相容蛋白(β-TrCP)免疫試劑盒進口、組裝

50T 綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

豬胎球蛋白A 免疫試劑盒進口、組裝

瓊脂培養(yǎng)基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g

2 ug pGTf2 pGTf2 低溫運輸，-20℃保存

2 ug pET-30 Xa/LIC pET-30 Xa/LIC 低溫運輸，-20℃保存

人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)免疫試劑盒

100mL Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.5  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5  常溫保存