詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
羧酸酯酶1(CES1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2358 |
英文名稱:Recombinant Carboxylesterase 1 (CES1)
ACAT; CEH; CES2; HMSE1; PCE1; SES1; TGH; Retinyl ester hydrolase; Serine esterase 1; Triacylglycerol hydrolase; Egasyn; Cocaine carboxylesterase; Liver Carboxylesterase 1
型號(hào):GOY-01D2358
酶與激酶
代謝通路
神經(jīng)科學(xué)
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測分子量:64.5kDa
實(shí)際分子量:60kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:His19~Leu565 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):5.9
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
過氧化還原酶4(PRDX4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 4 (PRDX4)Antioxidant enzyme AOE372; Thioredoxin-dependent peroxide reductase A0372物種:Human,人
前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)MGST1L1; MGST-IV; MGST1-L1; PGES; PIG12; PP102; PP1294; TP53I12; PGE Synthase; Tumor Protein p53 Inducible Protein 12; Glutathione S-Transferase 1-Like 1; MGST1-Like 1物種:Rat,大鼠
甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白21C(METTL21C)重組蛋白英文名稱:Recombinant Methyltransferase Like Protein 21C (METTL21C)C13orf39; Protein-lysine methyltransferase METTL21C物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
TE-13(人食管細(xì)胞)人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤(腦轉(zhuǎn)移)
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球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisWM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
綿馬貫眾素ABBA(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Dryocrassin ABBA
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綿馬ABA(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Filixic acid ABA
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植物桿菌 Lactobacillus plantarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
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費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii馬杜拉放線菌 Actinomadura sp.
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KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基
木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Oroxin B
羧酸酯酶1(CES1)重組蛋白小鼠人烯醇丙酮酸羧激,線粒體(PCK2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠蘋果酸脫氫(MDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人內(nèi)皮素2(EDN2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
液體沙氏培養(yǎng)基 Liquid Sabourand Medium 250g
50T 牛瘟病毒PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL TE Buffer,pH8.0 TE Buffer,pH8.0 常溫保存
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2mL dGTP溶液,2.5mM dGTP Solution -20℃保存
人唾液酸(SA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug SD1211- 4 SD1211- 4 低溫運(yùn)輸,-20℃保存