詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2199 |
英文名稱:Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)
CD249; GluAP; gp160; ATA; EAP; AP-A; Aminopeptidase A; Glutamyl Aminopeptidase
型號:GOY-01D2199
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預測分子量:56.0kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Asp75~Gly296 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
基質金屬13(MMP13)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)CLG3; Collagenase 3物種:Cattle,牛
二酰甘油-O-?;D移酶同源物1(DGAT1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1)ARGP1; DGAT; ARAT; ACAT-related gene product 1; Acyl-CoA retinol O-fatty-acyltransferase; Diglyceride acyltransferase物種:Mouse,小鼠
肉毒堿乙酰轉移酶(CRAT)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carnitine Acetyltransferase (CRAT)CAT1; Carnitine O-Acetyltransferase; Carnitine acetylase物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人腸微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基米曲霉 Aspergillus oryzae
鈣黃綠素乙酰甲酯 質量規(guī)格:>95%,美國進口原裝 Calcein-AM
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基
煙酰(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥99.5%,標準品 Nicotinamide
GBC-SD, 人膽囊細胞帚霉
5-羥色(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 5-Hydroxytryphan(5-HTP)
枝芽胞桿菌 Virgibacillus sp.球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
甲(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 cucurbitacins
泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠骨髓基質細胞
5-羥色(5-HTP) 質量規(guī)格:>98%,混旋 5-Hydroxytryphan
拜賴青霉LncaP, 人前列腺細胞
滅草煙,咪唑煙 質量規(guī)格:>98% Imazapyr acid
人神經(jīng)膠質瘤細胞鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
咪唑煙(標準品) 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 Imazapyr acid
PANC-1, 人胰腺細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
石膽(標準品) 質量規(guī)格:>97(GC),標準品 Lithocholic Acid
谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白小鼠猴子腎上腺髓質素(ADM)免疫試劑盒
2 ug pET-27b(+) pET-27b(+) 低溫運輸,-20℃保存
雞α酮戊二酸脫氫(α-KGDHC)免疫試劑盒
2 ug PT2-Venus PT2-Venus 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP1- C1 pEGFP1- C1 低溫運輸,-20℃保存
人血紅蛋白β亞基(HB-β)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠極低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒進口、分裝
人微管多特異性有機陰離子轉運蛋白1(ABCC2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
1%NaCl甘露糖 20支
人肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒
小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒