詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 貨號 |
過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白牛 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) | GOY-01D2177 |
英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 6 (PRDX6)
1-Cys; AOP2; NSGPx; PRX; aiPLA2; p29; Acidic calcium-independent phospholipase A2; Antioxidant protein 2; Non-selenium glutathione peroxidase; Red blood cells page spot 12
型號:GOY-01D2177
酶與激酶
物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞質
預測分子量:28.8kDa
實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Pro224 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:6.8
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產品:
支鏈轉氨酶2(BCAT2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Branched Chain Aminotransferase 2, Mitochondrial (BCAT2)BCAM; BCT2; PP18; BCATM; ECA40; Placental protein 18; Branched-chain-amino-acid aminotransferase, mitochondrial物種:Mouse,小鼠
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)KRP; MLCK108; MLCK210; MSTP083; MLCK; smMLCK; MYLK1; MLCK1; Telokin; Myosin Light Chain Kinase, Smooth Muscle, deglutamylated form; Kinase-related protein物種:Human,人
碳酸酐酶Ⅻ(CA12)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase XII (CA12)CA-XII; CAXII; Carbonate dehydratase XII; Tumor antigen HOM-RCC-3.1.3物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產品:
慶豐鏈霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus根瘤菌 Rhizobium sp.
羅替戈汀 質量規(guī)格:>95%,BR Rotigotine
AAV-293(人胚腎細胞)Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞)
鹽羅替戈汀 質量規(guī)格:>97%,BR Rotigotine Hydrochloride
白色綠僵菌 Metarhizium album香菇 Lentinula edodes
SGI-1776 質量規(guī)格:>98%,Pim1抑制劑 SGI-1776;SGI1776
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
生鹽鹽;右亞鹽鹽 質量規(guī)格:>99%,BR Dexrazoxane HCl
人肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)基人套細胞淋巴瘤細胞
JNJ-26854165 (Serdemetan) 質量規(guī)格:>98% JNJ 26854165
細胞名稱HT-29, 人結腸細胞
SB505124 質量規(guī)格:>98% SB-505124
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
NLG919 質量規(guī)格:>98%,IDO抑制劑 NLG-919
銅綠假單胞菌 Pseudomonas pyocynaea大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
維莫德吉(GDC0449) 質量規(guī)格:>98%,hedgehog抑制劑 Vismodegib;GDC-0449
過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白牛100mL Tricine Buffer,0.5M pH6.5 Tricine Buffer,0.5M pH6.5 常溫保存
1mg 鏈霉親和素 Streptavidin -20℃保存
50T 牛副流感病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
大鼠轉錄因子P65(RELA)免疫試劑盒
人游離蛋白S(FP-S)免疫試劑盒進口、分裝
50次 玻璃珠法柱式真菌DNAout Glassbeads Column Fungal DNAOUT 常溫
小鼠血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5 常溫
大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
YPDA培養(yǎng)基 YPDA Medium 250g
10mL G鈉鹽溶液 Penicillin G Sodium Solution -20 ℃避光保存