詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
胱天蛋白酶10(CASP10)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2147 |
英文名稱:Recombinant Caspase 10 (CASP10)
ALPS2; FLICE2; MCH4; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 10; FAS-associated death domain interleukin-1B-converting enzyme 2
型號(hào):GOY-01D2147
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
細(xì)胞凋亡
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:30.6kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Phe223~Gln459 (Accession # Q92851) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):6.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
精氨酰氨基肽酶(RNPEP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aminopeptidase B (RNPEP)AP-B; APB; Aminopeptidase B; Arginine aminopeptidase物種:Human,人
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶2(FUT2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fucosyltransferase 2 (FUT2)SE; Se2; Sej; Secretor Status Included; Galactoside 2-Alpha-L-Fucosyltransferase 2; Secretor blood group alpha-2-fucosyltransferase; Secretor factor物種:Human,人
蛋白激酶N2(PKN2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase N2 (PKN2)PRK2; Pak-2; PRKCL2; Protein Kinase C-Like 2; Protein-kinase C-related kinase 2; Serine/threonine-protein kinase N2; Cardiolipin-Activated Protein Kinase Pak2物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗜松青霉 Penicillium pinophilum皺狀假絲酵母 Candida versatilis
鈣黃綠素 質(zhì)量規(guī)格:IND Calcein
大豆慢生根瘤菌HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)
瑞氏色素 質(zhì)量規(guī)格:BS Wright's stain
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae香菇 Lentinula edodes
6-FAM, SE;6-羧基琥珀酰亞酯 質(zhì)量規(guī)格:0.9 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester
人結(jié)直腸腺細(xì)胞粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe
吉氏色素,姬姆氏色素 質(zhì)量規(guī)格:BS Giemsa stain
固囊酵母 Trichoderma longibrachiatum人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞
6-FAM ;6-羧基 質(zhì)量規(guī)格:0.95 6-Carboxyfluorescein
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基
5-FAM ;5-羧基 質(zhì)量規(guī)格:>95% 5-Carboxyfluorescein
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基康寧木霉 Trichoderma koningii
黑色素(水溶) 質(zhì)量規(guī)格:BS Nigrosine water soluble
香菇 Lentinula edodes枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
黑色素(溶) 質(zhì)量規(guī)格:BS Nigrosin alcohol soluble
胱天蛋白酶10(CASP10)重組蛋白人魚卵黃高磷蛋白(PV)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug pHis2 pHis2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人α甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pC-YFP pC-YFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pcDNA5 FRT pcDNA5 FRT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人NOD樣受體(NLR)免疫試劑盒
100mg 纖維蛋白原 Fibrinogen From Bovine Plasma -20℃保存
1 管 HB2151大腸桿菌 HB2151 E.coli Strain -80℃保存
50T 單增李斯特菌prfA基因(274bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1瓶 HMy2.CIR細(xì)胞株 HMy2.CIR 低溫運(yùn)輸和保存