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更新時間:2023-03-17 11:41:47瀏覽次數(shù):117

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2127 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (AS
物種 Homo sapiens (Human,人)    
N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:緊密連接蛋白15抗體 英文名稱:Claudin 15 0.1ml緊密連接蛋白12抗體 英文名稱:Claudin 12 0.1ml磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 英文名稱:phospho-CHEK1 (Ser286) 0.1ml

詳細介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

法尼基二磷酸合酶(FDPS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Farnesyl Diphosphate Synthase (FDPS)FPS; Farnesyl Pyrophosphate Synthetase; Dimethylallyltranstransferase; Geranyltranstransferase物種:Human,人

鈣調(diào)磷酸酶(CaN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Calcineurin (CaN)PPP3CA; PPP3-CA; CCN1; CNA1; CALN; CALNA1; PP2B; PP2-B; Protein Phosphatase 3(formerly 2B),Catalytic Subunit,Alpha Isoformprotein Phosphatase 2B; Calcineurin A Alpha物種:Human,人

泛素結(jié)合酶E2C結(jié)合蛋白E2I(UBE2I)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2I (UBE2I)P18; UBC9; UBCE9; SUMO-protein ligase; Ubiquitin carrier protein 9; Ubiquitin carrier protein I; Ubiquitin-protein ligase I; SUMO-conjugating enzyme UBC9物種:Human,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2127

 

 

英文名稱:Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase

型號:GOY-01D2127

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞膜, 分泌, 高爾基體

預(yù)測分子量:50.4kDa

實際分子量:21&40&56kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Ala451~Ile780 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:6.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

N-乙酰-L-氨 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR Ac-Ala-OH

 毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica

N-乙酰-D-氨 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR N-Acetyl-D-alanine

 5637(人膀胱細胞)QGY-7701, 人肝細胞

N-乙酰-L-酪氨 質(zhì)量規(guī)格:0.98 N-Acetyl-L-Tyrosine

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum人小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基

N-乙酰-L-谷氨酰 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR N-Acetyl-L-Glutamine

 泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

甲基橙(生物染色) 質(zhì)量規(guī)格:BS Methyl orange

 百脈根根瘤菌 Rhizobium loti大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

分散橙13 質(zhì)量規(guī)格:90%,進口分包 Disperse Orange 13

 P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)CaES-17(人食管細胞)

性橙74 質(zhì)量規(guī)格:>85% Acid Orange 74

 正灰綠正青霉 Eupenicillium euglaucum爪哇根霉 Rhizopus javanicus

煌橙,藏花橙G 質(zhì)量規(guī)格:BS Crocein Orange G

N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)重組蛋白人CVT瓊脂 CVT Agar 250g

植物玉米素核苷(ZR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒進口、組裝

2 ug pQE-80L pQE-80L 低溫運輸,-20℃保存

大鼠鈣調(diào)(CaN)免疫試劑盒

小鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒

兔纖溶抑制因子(TAFI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

5mg 衣 Tunicamycin 4℃保存

15mL  Hematoxylin Staining Solution 室溫保存

2 ug pCAMBIA1305.2 pCAMBIA1305.2 低溫運輸,-20℃保存

人沙眼衣原體抗原(CT)免疫試劑盒進口、組裝

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